猪Sar1b基因的分子克隆、序列分析及原核表达
저Sar1b기인적분자극륭、서렬분석급원핵표체
Molecular Cloning, Sequence Analysis and Prokaryotic Expression of the Porcine Sar1b Gene
  • 万方数据
    畜牧兽医学报 축목수의학보

    2007年 7期 625-629 ,共5页

    王学敏%刘榜%赵书红%樊斌%朱猛进%余梅%熊统安%李奎

    왕학민%류방%조서홍%번빈%주맹진%여매%웅통안%리규

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    根据GenBank已发表的猪Sarlb基因序列(GenBank登录号:AY819557)设计1对引物,以猪肝脏组织总RNA的反转录产物为扩增模板,用RT-PCR方法扩增出猪Sarlb基因cDNA全长编码区,经过EcoRI-SalI双酶切后定向克隆于pET28a原核表达载体,获得pET28a-Sarlb重组原核表达载体.将携带有重组原核表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)通过1 mmol/L ITPG进行诱导表达,经过SDS-PAGE电泳检测,显示诱导表达蛋白大小大约为26 ku,与预期表达蛋白大小一致.Western blot检测显示该蛋白为His融合蛋白,表明重组原核表达载体在大肠杆菌中成功表达出了目的融合蛋白.猪Sarlb基因的克隆和表达研究,为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础.
    근거GenBank이발표적저Sarlb기인서렬(GenBank등록호:AY819557)설계1대인물,이저간장조직총RNA적반전록산물위확증모판,용RT-PCR방법확증출저Sarlb기인cDNA전장편마구,경과EcoRI-SalI쌍매절후정향극륭우pET28a원핵표체재체,획득pET28a-Sarlb중조원핵표체재체.장휴대유중조원핵표체재체적대장간균BL21(DE3)통과1 mmol/L ITPG진행유도표체,경과SDS-PAGE전영검측,현시유도표체단백대소대약위26 ku,여예기표체단백대소일치.Western blot검측현시해단백위His융합단백,표명중조원핵표체재체재대장간균중성공표체출료목적융합단백.저Sarlb기인적극륭화표체연구,위진일보연구해기인적생물학공능전정료기출.
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