CAJ | 학술논문

目的:人工合成人胸腺素β16(Thymosin β16,Tβ16)的DNA序列,克隆到大肠杆菌蛋白表达载体pET3c中,获得了高表达菌株.经发酵、破菌、层析纯化、酶切后获得了Tβ16表达产物,并研究其体内外生物学活性.方法:将构建的重组His-SUMO-Tβ16融合蛋白的表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达.表达的融合蛋白经超声破碎、离子交换和金属亲和层析进行纯化后,用His-SUMO蛋白酶酶切,再经金属亲和层析和Superdex 30凝胶层析,获得胸腺素β16.对胸腺素β16进行体内外生物学活性研究.结果:重组His-SUMO-Tβ16融合蛋白为可溶性表达,Tβ16比活性为5.3×105 U/mg,在体外可促进BALB/c 3T3细胞增殖,促进兔角膜细胞的增殖,促进血管内皮细胞的增殖和迁移以及促进鸡胚绒毛膜血管的增殖;在体内可促进家兔碱烧伤皮肤愈合.结论:成功构建了重组His-SUMO-Tβ16融合蛋白的大肠杆菌表达载体,获得了重组Tβ16蛋白,其具有很好的修复作用,为进一步Tβ16产业化开发奠定了基础.
목적:인공합성인흉선소β16(Thymosin β16,Tβ16)적DNA서렬,극륭도대장간균단백표체재체pET3c중,획득료고표체균주.경발효、파균、층석순화、매절후획득료Tβ16표체산물,병연구기체내외생물학활성.방법:장구건적중조His-SUMO-Tβ16융합단백적표체재체전화대장간균BL21(DE3)진행유도표체.표체적융합단백경초성파쇄、리자교환화금속친화층석진행순화후,용His-SUMO단백매매절,재경금속친화층석화Superdex 30응효층석,획득흉선소β16.대흉선소β16진행체내외생물학활성연구.결과:중조His-SUMO-Tβ16융합단백위가용성표체,Tβ16비활성위5.3×105 U/mg,재체외가촉진BALB/c 3T3세포증식,촉진토각막세포적증식,촉진혈관내피세포적증식화천이이급촉진계배융모막혈관적증식;재체내가촉진가토감소상피부유합.결론:성공구건료중조His-SUMO-Tβ16융합단백적대장간균표체재체,획득료중조Tβ16단백,기구유흔호적수복작용,위진일보Tβ16산업화개발전정료기출.