延边大学农学学报
延邊大學農學學報
연변대학농학학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCE YANBIAN UNIVERSITY
2009年
2期
130-134
,共5页
牛瑟氏泰勒虫%P23表面蛋白基因%表达条件%优化
牛瑟氏泰勒蟲%P23錶麵蛋白基因%錶達條件%優化
우슬씨태륵충%P23표면단백기인%표체조건%우화
将已构建并测序正确的含有牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白基因的pGEX-4T-P23转化菌用IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子量为46.0 ku的融合蛋白.根据SDS-PAGE确定融合蛋白的最佳表达条件,结果显示诱导时机和时间是影响表达的主要因素,诱导温度和IPTG浓度次之;确定最佳诱导时机为转接种后2.0 h,最佳诱导温度34 ℃,最佳诱导时间6.0 h,最适IPTG浓度0.08 mmol/L.表达产物主要以包涵体存在,在优化条件下融合蛋白的表达量经Bandscan5.0软件分析约占菌体总蛋白的31.7%.
將已構建併測序正確的含有牛瑟氏泰勒蟲P23錶麵蛋白基因的pGEX-4T-P23轉化菌用IPTG進行誘導錶達,經SDS-PAGE電泳可檢測到相對分子量為46.0 ku的融閤蛋白.根據SDS-PAGE確定融閤蛋白的最佳錶達條件,結果顯示誘導時機和時間是影響錶達的主要因素,誘導溫度和IPTG濃度次之;確定最佳誘導時機為轉接種後2.0 h,最佳誘導溫度34 ℃,最佳誘導時間6.0 h,最適IPTG濃度0.08 mmol/L.錶達產物主要以包涵體存在,在優化條件下融閤蛋白的錶達量經Bandscan5.0軟件分析約佔菌體總蛋白的31.7%.
장이구건병측서정학적함유우슬씨태륵충P23표면단백기인적pGEX-4T-P23전화균용IPTG진행유도표체,경SDS-PAGE전영가검측도상대분자량위46.0 ku적융합단백.근거SDS-PAGE학정융합단백적최가표체조건,결과현시유도시궤화시간시영향표체적주요인소,유도온도화IPTG농도차지;학정최가유도시궤위전접충후2.0 h,최가유도온도34 ℃,최가유도시간6.0 h,최괄IPTG농도0.08 mmol/L.표체산물주요이포함체존재,재우화조건하융합단백적표체량경Bandscan5.0연건분석약점균체총단백적31.7%.
