河北农业大学学报
河北農業大學學報
하북농업대학학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL UNIVERSITY OF HEBEI
2010年
4期
77-80
,共4页
松毛虫%PCR反应体系%正交设计%优化
鬆毛蟲%PCR反應體繫%正交設計%優化
송모충%PCR반응체계%정교설계%우화
为了应用线粒体DNA研究松毛虫种群的遗传结构,本研究采用正交试验设计法L16(45)对影响松毛虫mtDNA PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化试验并对PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了单因素梯度比较优化.建立了松毛虫mtDNA PCR反应的最佳体系即在50 μL体系中含模板150 ng、0.10 μmol/L引物、0.4 mmol/L dNTP、1.0UTaq DNA聚合酶、2.5 mmol/L Mg2+.同时通过PCR比较,确定最佳循环次数为35个循环,最佳退火温度为56 ℃,获得了松毛虫mtDNA PCR反应的最佳扩增程序.
為瞭應用線粒體DNA研究鬆毛蟲種群的遺傳結構,本研究採用正交試驗設計法L16(45)對影響鬆毛蟲mtDNA PCR反應體繫的5箇因素(Taq酶、Mg2+、模闆DNA、dNTP、引物)在4箇水平上進行優化試驗併對PCR擴增程序中的退火溫度及循環次數進行瞭單因素梯度比較優化.建立瞭鬆毛蟲mtDNA PCR反應的最佳體繫即在50 μL體繫中含模闆150 ng、0.10 μmol/L引物、0.4 mmol/L dNTP、1.0UTaq DNA聚閤酶、2.5 mmol/L Mg2+.同時通過PCR比較,確定最佳循環次數為35箇循環,最佳退火溫度為56 ℃,穫得瞭鬆毛蟲mtDNA PCR反應的最佳擴增程序.
위료응용선립체DNA연구송모충충군적유전결구,본연구채용정교시험설계법L16(45)대영향송모충mtDNA PCR반응체계적5개인소(Taq매、Mg2+、모판DNA、dNTP、인물)재4개수평상진행우화시험병대PCR확증정서중적퇴화온도급순배차수진행료단인소제도비교우화.건립료송모충mtDNA PCR반응적최가체계즉재50 μL체계중함모판150 ng、0.10 μmol/L인물、0.4 mmol/L dNTP、1.0UTaq DNA취합매、2.5 mmol/L Mg2+.동시통과PCR비교,학정최가순배차수위35개순배,최가퇴화온도위56 ℃,획득료송모충mtDNA PCR반응적최가확증정서.
