畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2010年
9期
30-33
,共4页
贾文影%张吉浩%高建伟%杜秋明%许应天%鲁承
賈文影%張吉浩%高建偉%杜鞦明%許應天%魯承
가문영%장길호%고건위%두추명%허응천%로승
新孢子虫核糖体磷蛋白(NcPO)%Vero细胞%真核表达
新孢子蟲覈糖體燐蛋白(NcPO)%Vero細胞%真覈錶達
신포자충핵당체린단백(NcPO)%Vero세포%진핵표체
采用PCR技术扩增出新孢子虫核糖体磷蛋白(NcPO)全长基因片段,并将其克隆入真核表达载体pVAX1中,构建pVAX1一NcPO表达载体.用脂质体法将阳性克隆瞬时转染Vero细胞,对转染细胞进行RT-PCR检测和IFA检测目的基因的转录与表达情况.结果表明克隆的PO蛋白基因序列全长为1 379 bp;RT-PCR结果显示目的基因已被成功转录;IFA检测证明目的基因被成功表达.本试验成功构建了NcPO的真核表达载体,转染Vero细胞,获得了NcPO的瞬时表达.
採用PCR技術擴增齣新孢子蟲覈糖體燐蛋白(NcPO)全長基因片段,併將其剋隆入真覈錶達載體pVAX1中,構建pVAX1一NcPO錶達載體.用脂質體法將暘性剋隆瞬時轉染Vero細胞,對轉染細胞進行RT-PCR檢測和IFA檢測目的基因的轉錄與錶達情況.結果錶明剋隆的PO蛋白基因序列全長為1 379 bp;RT-PCR結果顯示目的基因已被成功轉錄;IFA檢測證明目的基因被成功錶達.本試驗成功構建瞭NcPO的真覈錶達載體,轉染Vero細胞,穫得瞭NcPO的瞬時錶達.
채용PCR기술확증출신포자충핵당체린단백(NcPO)전장기인편단,병장기극륭입진핵표체재체pVAX1중,구건pVAX1일NcPO표체재체.용지질체법장양성극륭순시전염Vero세포,대전염세포진행RT-PCR검측화IFA검측목적기인적전록여표체정황.결과표명극륭적PO단백기인서렬전장위1 379 bp;RT-PCR결과현시목적기인이피성공전록;IFA검측증명목적기인피성공표체.본시험성공구건료NcPO적진핵표체재체,전염Vero세포,획득료NcPO적순시표체.
