中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2000年
3期
144-146,150
,共4页
鲁晓知%郑琳%严家新%朱家鸿
魯曉知%鄭琳%嚴傢新%硃傢鴻
로효지%정림%엄가신%주가홍
丙型肝炎病毒%E2基因%pET载体
丙型肝炎病毒%E2基因%pET載體
병형간염병독%E2기인%pET재체
目的为了获得大量重组HCVE2蛋白,以研究E2抗体潜在的保护作用.方法利用PCR方法从HCV基因组序列中扩增出931bp的E2基因片段,经EcoRI和Sall双酶切后连接到pET-28a表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,得到重组质粒PET-E2,工程菌经IPIG诱导培养,明显表达出HCVE2蛋白,表达产物经固定化金属配体亲和层析纯化,用ELISA方法检测生物学活性.结果表达产物主要以包涵体形式存在,表达量达菌体蛋白的18%以上,目的蛋白具有良好的反应原性.结论HCVE2基因的克隆与表达为进一步开展HCVE2蛋白和疫苗研究奠定了基础.
目的為瞭穫得大量重組HCVE2蛋白,以研究E2抗體潛在的保護作用.方法利用PCR方法從HCV基因組序列中擴增齣931bp的E2基因片段,經EcoRI和Sall雙酶切後連接到pET-28a錶達載體上,轉化大腸桿菌BL21(DE3)菌株,得到重組質粒PET-E2,工程菌經IPIG誘導培養,明顯錶達齣HCVE2蛋白,錶達產物經固定化金屬配體親和層析純化,用ELISA方法檢測生物學活性.結果錶達產物主要以包涵體形式存在,錶達量達菌體蛋白的18%以上,目的蛋白具有良好的反應原性.結論HCVE2基因的剋隆與錶達為進一步開展HCVE2蛋白和疫苗研究奠定瞭基礎.
목적위료획득대량중조HCVE2단백,이연구E2항체잠재적보호작용.방법이용PCR방법종HCV기인조서렬중확증출931bp적E2기인편단,경EcoRI화Sall쌍매절후련접도pET-28a표체재체상,전화대장간균BL21(DE3)균주,득도중조질립PET-E2,공정균경IPIG유도배양,명현표체출HCVE2단백,표체산물경고정화금속배체친화층석순화,용ELISA방법검측생물학활성.결과표체산물주요이포함체형식존재,표체량체균체단백적18%이상,목적단백구유량호적반응원성.결론HCVE2기인적극륭여표체위진일보개전HCVE2단백화역묘연구전정료기출.
