中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2012年
5期
444-448
,共5页
蒋建国%刘瑞玲%付永锋%程训佳
蔣建國%劉瑞玲%付永鋒%程訓佳
장건국%류서령%부영봉%정훈가
日本柳杉%CJP-6%变应原%交叉反应性%IgE
日本柳杉%CJP-6%變應原%交扠反應性%IgE
일본류삼%CJP-6%변응원%교차반응성%IgE
目的 获得日本柳杉花粉主要变应原CJP-6的编码基因,构建其原核表达载体进行表达,并对重组CJP-6(rCJP-6)进行免疫活性鉴定.方法 从日本柳杉花粉中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增CJP-6编码基因,将其克隆入pET-19b表达载体.转入大肠杆菌BL21 Star (DE3) pLysS,经IPTG诱导表达,以Ni2+亲和层析柱对重组变应原进行纯化,采用Dot blot和ELISA方法检测重组变应原rCJP-6与对日本柳杉花粉、尘螨和蒿草花粉过敏患者的血清中的IgE反应活性.结果 重组变应原与日本柳杉花粉过敏患者血清中的IgE具有较高的结合活性,rCJP-6与尘螨、蒿草花粉过敏患者血清中的IgE也具有很高的反应性,而且反应性与日本柳杉花粉过敏的患者血清相似.结论 制备并获得了具有IgE结合活性的重组日本柳杉花粉变应原CJP-6,日本柳杉花粉变应原是中国过敏反应性疾病患者潜在的变应原,为国内过敏反应性疾病的临床诊断和免疫治疗及进一步的实验研究奠定了基础.
目的 穫得日本柳杉花粉主要變應原CJP-6的編碼基因,構建其原覈錶達載體進行錶達,併對重組CJP-6(rCJP-6)進行免疫活性鑒定.方法 從日本柳杉花粉中提取總RNA,採用RT-PCR的方法擴增CJP-6編碼基因,將其剋隆入pET-19b錶達載體.轉入大腸桿菌BL21 Star (DE3) pLysS,經IPTG誘導錶達,以Ni2+親和層析柱對重組變應原進行純化,採用Dot blot和ELISA方法檢測重組變應原rCJP-6與對日本柳杉花粉、塵螨和蒿草花粉過敏患者的血清中的IgE反應活性.結果 重組變應原與日本柳杉花粉過敏患者血清中的IgE具有較高的結閤活性,rCJP-6與塵螨、蒿草花粉過敏患者血清中的IgE也具有很高的反應性,而且反應性與日本柳杉花粉過敏的患者血清相似.結論 製備併穫得瞭具有IgE結閤活性的重組日本柳杉花粉變應原CJP-6,日本柳杉花粉變應原是中國過敏反應性疾病患者潛在的變應原,為國內過敏反應性疾病的臨床診斷和免疫治療及進一步的實驗研究奠定瞭基礎.
목적 획득일본류삼화분주요변응원CJP-6적편마기인,구건기원핵표체재체진행표체,병대중조CJP-6(rCJP-6)진행면역활성감정.방법 종일본류삼화분중제취총RNA,채용RT-PCR적방법확증CJP-6편마기인,장기극륭입pET-19b표체재체.전입대장간균BL21 Star (DE3) pLysS,경IPTG유도표체,이Ni2+친화층석주대중조변응원진행순화,채용Dot blot화ELISA방법검측중조변응원rCJP-6여대일본류삼화분、진만화호초화분과민환자적혈청중적IgE반응활성.결과 중조변응원여일본류삼화분과민환자혈청중적IgE구유교고적결합활성,rCJP-6여진만、호초화분과민환자혈청중적IgE야구유흔고적반응성,이차반응성여일본류삼화분과민적환자혈청상사.결론 제비병획득료구유IgE결합활성적중조일본류삼화분변응원CJP-6,일본류삼화분변응원시중국과민반응성질병환자잠재적변응원,위국내과민반응성질병적림상진단화면역치료급진일보적실험연구전정료기출.
