高等学校化学学报
高等學校化學學報
고등학교화학학보
CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES
2012年
5期
925-930
,共6页
蛋白折叠%核糖核酸酶%离子交换色谱%谷胱甘肽键合柱
蛋白摺疊%覈糖覈痠酶%離子交換色譜%穀胱甘肽鍵閤柱
단백절첩%핵당핵산매%리자교환색보%곡광감태건합주
将氧化还原型谷胱甘肽( GSH/GSSG)共价键合到色谱固定相上,实现了对变性核糖核酸酶(RNase)的复性.实验发现,谷胱甘肽键合柱具有典型的弱阳离子交换性质,在离子交换(IEC)模式下能够对4种标准蛋白进行基线分离,且具有较高的柱效.当蛋白浓度为5 mg/mL,流速为0.2 mL/min时,在流动相中不加GSH/GSSG的条件下,GSH/GSSG柱对变性核糖核酸酶的活性回收率可达(39.5±3.8)％,而普通IEC柱对变性核糖核酸酶的活性回收率几乎为0,说明其对变性蛋白二硫键的正确对接具有明显的促进作用；在收集液中加入GSH/GSSG后,其活性回收率可达到(81.5±4.3)％.本文结果对蛋白折叠液相色谱法的发展及降低蛋白复性成本具有一定的应用价值.
將氧化還原型穀胱甘肽( GSH/GSSG)共價鍵閤到色譜固定相上,實現瞭對變性覈糖覈痠酶(RNase)的複性.實驗髮現,穀胱甘肽鍵閤柱具有典型的弱暘離子交換性質,在離子交換(IEC)模式下能夠對4種標準蛋白進行基線分離,且具有較高的柱效.噹蛋白濃度為5 mg/mL,流速為0.2 mL/min時,在流動相中不加GSH/GSSG的條件下,GSH/GSSG柱對變性覈糖覈痠酶的活性迴收率可達(39.5±3.8)％,而普通IEC柱對變性覈糖覈痠酶的活性迴收率幾乎為0,說明其對變性蛋白二硫鍵的正確對接具有明顯的促進作用；在收集液中加入GSH/GSSG後,其活性迴收率可達到(81.5±4.3)％.本文結果對蛋白摺疊液相色譜法的髮展及降低蛋白複性成本具有一定的應用價值.
장양화환원형곡광감태( GSH/GSSG)공개건합도색보고정상상,실현료대변성핵당핵산매(RNase)적복성.실험발현,곡광감태건합주구유전형적약양리자교환성질,재리자교환(IEC)모식하능구대4충표준단백진행기선분리,차구유교고적주효.당단백농도위5 mg/mL,류속위0.2 mL/min시,재류동상중불가GSH/GSSG적조건하,GSH/GSSG주대변성핵당핵산매적활성회수솔가체(39.5±3.8)％,이보통IEC주대변성핵당핵산매적활성회수솔궤호위0,설명기대변성단백이류건적정학대접구유명현적촉진작용；재수집액중가입GSH/GSSG후,기활성회수솔가체도(81.5±4.3)％.본문결과대단백절첩액상색보법적발전급강저단백복성성본구유일정적응용개치.
