军医进修学院学报
軍醫進脩學院學報
군의진수학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF PLA POSTGRADUATE MEDICAL SCHOOL
2004年
1期
47-49
,共3页
朱晗玉%陈香美%何娅妮%洪权%孙雪蜂
硃晗玉%陳香美%何婭妮%洪權%孫雪蜂
주함옥%진향미%하아니%홍권%손설봉
人钠/二羧基转运蛋白2%基因融合%肾
人鈉/二羧基轉運蛋白2%基因融閤%腎
인납/이최기전운단백2%기인융합%신
目的:观测和鉴定人钠/二羧基转运蛋白 2(hSDCT2)在大肠杆菌中的表达,并分离、纯化其蛋白产物.方法:应用DNA重组技术,构建重组表达质粒 pGEX-hSDCT2;IPTG 诱导其表达.采用谷胱甘肽偶联的 Sepharose 4B 亲和层析纯化GST-hSDCT2,经 Factor Xa 酶切和二次亲和层析后,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western Blotting 进行鉴定.结果:成功构建 hSDCT2 基因融合蛋白载体,SDS-PAGE及 Western Blotting 显示 GST-hSDCT2 融合蛋白表达于原核细胞,蛋白产量约占菌体总蛋白量的 25%.经酶切及二次纯化后,获得纯化的 hSDCT2 蛋白.结论:人钠/二羧基转运蛋白 2 可在大肠杆菌中稳定表达.
目的:觀測和鑒定人鈉/二羧基轉運蛋白 2(hSDCT2)在大腸桿菌中的錶達,併分離、純化其蛋白產物.方法:應用DNA重組技術,構建重組錶達質粒 pGEX-hSDCT2;IPTG 誘導其錶達.採用穀胱甘肽偶聯的 Sepharose 4B 親和層析純化GST-hSDCT2,經 Factor Xa 酶切和二次親和層析後,採用聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和Western Blotting 進行鑒定.結果:成功構建 hSDCT2 基因融閤蛋白載體,SDS-PAGE及 Western Blotting 顯示 GST-hSDCT2 融閤蛋白錶達于原覈細胞,蛋白產量約佔菌體總蛋白量的 25%.經酶切及二次純化後,穫得純化的 hSDCT2 蛋白.結論:人鈉/二羧基轉運蛋白 2 可在大腸桿菌中穩定錶達.
목적:관측화감정인납/이최기전운단백 2(hSDCT2)재대장간균중적표체,병분리、순화기단백산물.방법:응용DNA중조기술,구건중조표체질립 pGEX-hSDCT2;IPTG 유도기표체.채용곡광감태우련적 Sepharose 4B 친화층석순화GST-hSDCT2,경 Factor Xa 매절화이차친화층석후,채용취병희선알응효전영(SDS-PAGE)화Western Blotting 진행감정.결과:성공구건 hSDCT2 기인융합단백재체,SDS-PAGE급 Western Blotting 현시 GST-hSDCT2 융합단백표체우원핵세포,단백산량약점균체총단백량적 25%.경매절급이차순화후,획득순화적 hSDCT2 단백.결론:인납/이최기전운단백 2 가재대장간균중은정표체.
