核农学报
覈農學報
핵농학보
ACTA AGRICULTURAE NUCLEATAE SINICA
2004年
1期
55-58,35
,共5页
刘国霞%曾宪垠%包伦%徐贤坤%陈志渝%刘显义
劉國霞%曾憲垠%包倫%徐賢坤%陳誌渝%劉顯義
류국하%증헌은%포륜%서현곤%진지투%류현의
促红细胞生成素%放射性碘标记%标记蛋白纯化%TCA沉淀法%SDS-PAGE%网织红细胞
促紅細胞生成素%放射性碘標記%標記蛋白純化%TCA沉澱法%SDS-PAGE%網織紅細胞
촉홍세포생성소%방사성전표기%표기단백순화%TCA침정법%SDS-PAGE%망직홍세포
采用改进的双相氯胺-T法对LL-EPO进行碘标记,使用离心超滤法分离纯化标记混合物,对标记纯化的LL-EPO经三氯乙酸沉淀和SDS-PAGE法鉴定放化纯度,通过网织红细胞法对标记前后的蛋白生物活性进行鉴定.结果表明:1.改进的双相氯胺-T法标记LL-EPO,其标记率为89%,比放射性为5.82×105Bq·μg-1蛋白,放化纯度＞96%,SDS-PAGE法鉴定标记产物同原型蛋白电泳行为一致,Rf值分别为0.28、0.49,网织红细胞法鉴定的标记蛋白与非标记蛋白的生物活性无差异.2.离心超滤法得到的蛋白回收率为95%以上,而凝胶过滤法得到的蛋白回收率仅为23.82%;前者得到的标记蛋白浓度远高于后者.
採用改進的雙相氯胺-T法對LL-EPO進行碘標記,使用離心超濾法分離純化標記混閤物,對標記純化的LL-EPO經三氯乙痠沉澱和SDS-PAGE法鑒定放化純度,通過網織紅細胞法對標記前後的蛋白生物活性進行鑒定.結果錶明:1.改進的雙相氯胺-T法標記LL-EPO,其標記率為89%,比放射性為5.82×105Bq·μg-1蛋白,放化純度＞96%,SDS-PAGE法鑒定標記產物同原型蛋白電泳行為一緻,Rf值分彆為0.28、0.49,網織紅細胞法鑒定的標記蛋白與非標記蛋白的生物活性無差異.2.離心超濾法得到的蛋白迴收率為95%以上,而凝膠過濾法得到的蛋白迴收率僅為23.82%;前者得到的標記蛋白濃度遠高于後者.
채용개진적쌍상록알-T법대LL-EPO진행전표기,사용리심초려법분리순화표기혼합물,대표기순화적LL-EPO경삼록을산침정화SDS-PAGE법감정방화순도,통과망직홍세포법대표기전후적단백생물활성진행감정.결과표명:1.개진적쌍상록알-T법표기LL-EPO,기표기솔위89%,비방사성위5.82×105Bq·μg-1단백,방화순도＞96%,SDS-PAGE법감정표기산물동원형단백전영행위일치,Rf치분별위0.28、0.49,망직홍세포법감정적표기단백여비표기단백적생물활성무차이.2.리심초려법득도적단백회수솔위95%이상,이응효과려법득도적단백회수솔부위23.82%;전자득도적표기단백농도원고우후자.
