中草药
中草藥
중초약
CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
2005年
3期
419-423
,共5页
李永谊%虞泓%朱荣勋%和锐%倪念春
李永誼%虞泓%硃榮勛%和銳%倪唸春
리영의%우홍%주영훈%화예%예념춘
红景天属%直接扩增片段长度多态性%分子标记%反应体系
紅景天屬%直接擴增片段長度多態性%分子標記%反應體繫
홍경천속%직접확증편단장도다태성%분자표기%반응체계
目的利用直接扩增片段长度多态性(DALP)这一新分子标记技术建立一套稳定的红景天属植物的DALP反应体系.方法以红景天基因组DNA为模板,对DALP反应程序的一些重要参数进行摸索和优化试验.结果建立了一套稳定性强、可靠性高的DALP应用反应体系;经过大量重复性实验,反应体系为20μL,Mg2+浓度为2.5mmol/L,dNTPs浓度为1.25mmol/L,模板DNA的量为60ng,5pmol/L选择性引物1μL,5pmol/L反向引物3μL,引物浓度比为1:3,Taq酶2U.反应过程为:95℃预变性5min、94℃变性30s、50℃退火30s、72℃延伸1min;30个循环,再72℃延伸10min,完成整个PCR反应.结论该体系可有效地应用于红景天属药材的分类鉴定和地道性鉴定.
目的利用直接擴增片段長度多態性(DALP)這一新分子標記技術建立一套穩定的紅景天屬植物的DALP反應體繫.方法以紅景天基因組DNA為模闆,對DALP反應程序的一些重要參數進行摸索和優化試驗.結果建立瞭一套穩定性彊、可靠性高的DALP應用反應體繫;經過大量重複性實驗,反應體繫為20μL,Mg2+濃度為2.5mmol/L,dNTPs濃度為1.25mmol/L,模闆DNA的量為60ng,5pmol/L選擇性引物1μL,5pmol/L反嚮引物3μL,引物濃度比為1:3,Taq酶2U.反應過程為:95℃預變性5min、94℃變性30s、50℃退火30s、72℃延伸1min;30箇循環,再72℃延伸10min,完成整箇PCR反應.結論該體繫可有效地應用于紅景天屬藥材的分類鑒定和地道性鑒定.
목적이용직접확증편단장도다태성(DALP)저일신분자표기기술건립일투은정적홍경천속식물적DALP반응체계.방법이홍경천기인조DNA위모판,대DALP반응정서적일사중요삼수진행모색화우화시험.결과건립료일투은정성강、가고성고적DALP응용반응체계;경과대량중복성실험,반응체계위20μL,Mg2+농도위2.5mmol/L,dNTPs농도위1.25mmol/L,모판DNA적량위60ng,5pmol/L선택성인물1μL,5pmol/L반향인물3μL,인물농도비위1:3,Taq매2U.반응과정위:95℃예변성5min、94℃변성30s、50℃퇴화30s、72℃연신1min;30개순배,재72℃연신10min,완성정개PCR반응.결론해체계가유효지응용우홍경천속약재적분류감정화지도성감정.
