分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2005年
7期
927-930
,共4页
转Bt基因水稻%Cry1Ab蛋白%疏水层析%纯化
轉Bt基因水稻%Cry1Ab蛋白%疏水層析%純化
전Bt기인수도%Cry1Ab단백%소수층석%순화
以转Bt基因水稻为试材,研究其表达产物Cry1Ab蛋白的提取、分离及纯化的方法.实验结果表明,DEAE-纤维素填料对Bt 蛋白有较好捕获效果.根据生物信息学方法预测了目标蛋白和主要共存蛋白的等电点和疏水性差异.合理地选择了阴离子交换色谱与疏水作用色谱组合方法.提取液经DEAE-Sephadex A-50柱层析及Phenyl-Sepharose Fast Flow 疏水层析分离后,目标蛋白得到了显著的纯化.考察了疏水层析中用不同洗脱液洗脱Cry1Ab蛋白对活性回收率和纯度的影响,结果表明:以0.25 mol/L KSCN作洗脱液对活性影响最小,HIC一步纯化倍数可达8倍,总纯化倍数达100倍.
以轉Bt基因水稻為試材,研究其錶達產物Cry1Ab蛋白的提取、分離及純化的方法.實驗結果錶明,DEAE-纖維素填料對Bt 蛋白有較好捕穫效果.根據生物信息學方法預測瞭目標蛋白和主要共存蛋白的等電點和疏水性差異.閤理地選擇瞭陰離子交換色譜與疏水作用色譜組閤方法.提取液經DEAE-Sephadex A-50柱層析及Phenyl-Sepharose Fast Flow 疏水層析分離後,目標蛋白得到瞭顯著的純化.攷察瞭疏水層析中用不同洗脫液洗脫Cry1Ab蛋白對活性迴收率和純度的影響,結果錶明:以0.25 mol/L KSCN作洗脫液對活性影響最小,HIC一步純化倍數可達8倍,總純化倍數達100倍.
이전Bt기인수도위시재,연구기표체산물Cry1Ab단백적제취、분리급순화적방법.실험결과표명,DEAE-섬유소전료대Bt 단백유교호포획효과.근거생물신식학방법예측료목표단백화주요공존단백적등전점화소수성차이.합리지선택료음리자교환색보여소수작용색보조합방법.제취액경DEAE-Sephadex A-50주층석급Phenyl-Sepharose Fast Flow 소수층석분리후,목표단백득도료현저적순화.고찰료소수층석중용불동세탈액세탈Cry1Ab단백대활성회수솔화순도적영향,결과표명:이0.25 mol/L KSCN작세탈액대활성영향최소,HIC일보순화배수가체8배,총순화배수체100배.
