生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2007年
4期
366-374
,共9页
杨一新%杨云波%李小玲%彭聪%郭勤%沈守荣%李桂源
楊一新%楊雲波%李小玲%彭聰%郭勤%瀋守榮%李桂源
양일신%양운파%리소령%팽총%곽근%침수영%리계원
LPLUNC1基因%鼻咽癌%HNE1%基因转染%基因功能
LPLUNC1基因%鼻嚥癌%HNE1%基因轉染%基因功能
LPLUNC1기인%비인암%HNE1%기인전염%기인공능
LPLUNC1在正常的鼻咽组织及人胚鼻咽组织中高表达,而在71%的鼻咽癌中表达下调或缺失,是与鼻咽癌的发生发展密切相关的新基因.通过研究LPLUNC1基因对鼻咽癌细胞系HNE1的影响,进一步确定其与鼻咽癌发生发展的关系.将LPLUNC1基因全长cDNA克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体中,通过脂质体介导稳定转染入LPLUNC1低表达鼻咽癌细胞系HNE1中,通过RT-PCR及RNA印迹筛选LPLUNC1高表达的细胞株,并利用细胞生长曲线、MTT、BrdU掺入、流式细胞仪检测、软琼脂集落形成实验及裸鼠成瘤等实验,研究了LPLUNC1对鼻咽癌细胞系HNE1细胞生长、增殖的影响.结果发现,稳定转染LPLUNC1的HNE1细胞的生长速度明显减慢,在MTT与BrdU掺入实验发现LPLUNC1可明显地抑制鼻咽癌细胞的增殖,并且通过流式细胞仪检测也发现,LPLUNC1基因可明显延缓HNE1细胞的细胞周期进程,使G0/G1期细胞增多而S期细胞相对减少.进一步通过软琼脂集落形成及裸鼠成瘤实验发现,LPLUNC1稳定转染后的HNE1细胞集落形成率与集落的大小均小于空白载体细胞,同时能明显地抑制HNE1细胞的体外成瘤.结果表明,LPLUNC1基因能明显抑制鼻明癌细胞HNE1的生长增殖,是鼻咽癌发生发展中的重要候选抑瘤基因之一.
LPLUNC1在正常的鼻嚥組織及人胚鼻嚥組織中高錶達,而在71%的鼻嚥癌中錶達下調或缺失,是與鼻嚥癌的髮生髮展密切相關的新基因.通過研究LPLUNC1基因對鼻嚥癌細胞繫HNE1的影響,進一步確定其與鼻嚥癌髮生髮展的關繫.將LPLUNC1基因全長cDNA剋隆入pcDNA3.1(+)真覈錶達載體中,通過脂質體介導穩定轉染入LPLUNC1低錶達鼻嚥癌細胞繫HNE1中,通過RT-PCR及RNA印跡篩選LPLUNC1高錶達的細胞株,併利用細胞生長麯線、MTT、BrdU摻入、流式細胞儀檢測、軟瓊脂集落形成實驗及裸鼠成瘤等實驗,研究瞭LPLUNC1對鼻嚥癌細胞繫HNE1細胞生長、增殖的影響.結果髮現,穩定轉染LPLUNC1的HNE1細胞的生長速度明顯減慢,在MTT與BrdU摻入實驗髮現LPLUNC1可明顯地抑製鼻嚥癌細胞的增殖,併且通過流式細胞儀檢測也髮現,LPLUNC1基因可明顯延緩HNE1細胞的細胞週期進程,使G0/G1期細胞增多而S期細胞相對減少.進一步通過軟瓊脂集落形成及裸鼠成瘤實驗髮現,LPLUNC1穩定轉染後的HNE1細胞集落形成率與集落的大小均小于空白載體細胞,同時能明顯地抑製HNE1細胞的體外成瘤.結果錶明,LPLUNC1基因能明顯抑製鼻明癌細胞HNE1的生長增殖,是鼻嚥癌髮生髮展中的重要候選抑瘤基因之一.
LPLUNC1재정상적비인조직급인배비인조직중고표체,이재71%적비인암중표체하조혹결실,시여비인암적발생발전밀절상관적신기인.통과연구LPLUNC1기인대비인암세포계HNE1적영향,진일보학정기여비인암발생발전적관계.장LPLUNC1기인전장cDNA극륭입pcDNA3.1(+)진핵표체재체중,통과지질체개도은정전염입LPLUNC1저표체비인암세포계HNE1중,통과RT-PCR급RNA인적사선LPLUNC1고표체적세포주,병이용세포생장곡선、MTT、BrdU참입、류식세포의검측、연경지집락형성실험급라서성류등실험,연구료LPLUNC1대비인암세포계HNE1세포생장、증식적영향.결과발현,은정전염LPLUNC1적HNE1세포적생장속도명현감만,재MTT여BrdU참입실험발현LPLUNC1가명현지억제비인암세포적증식,병차통과류식세포의검측야발현,LPLUNC1기인가명현연완HNE1세포적세포주기진정,사G0/G1기세포증다이S기세포상대감소.진일보통과연경지집락형성급라서성류실험발현,LPLUNC1은정전염후적HNE1세포집락형성솔여집락적대소균소우공백재체세포,동시능명현지억제HNE1세포적체외성류.결과표명,LPLUNC1기인능명현억제비명암세포HNE1적생장증식,시비인암발생발전중적중요후선억류기인지일.
