目的:建立适合骨髓衍生肝干细胞移植的小鼠酒精性肝纤维化模型,为移植骨髓衍生肝干细胞对酒精性肝损伤修复的研究提供进一步探讨的价值.方法:实验于2006-02/06在南方医科大学实验动物中心完成.取Balb/c雌性小鼠100只,SPF级,5～6周龄,体质量15～18 g,随机区组法分为造模组92只,对照组8只.用白酒灌胃法建立小鼠酒精性肝纤维化模型.造模组于灌胃的第4,8,12,16周末分别随机选取6只小鼠,眼球采血后,颈椎脱臼处死,取出肝脏,以100 g/L的甲醛固定,石蜡包埋切片,苏木精-伊红染色和苦味酸-酸性复红染色,光镜观察病理变化.血标本用于测定生化及肝纤维化指标.对照组以等量的蒸馏水灌胃,于实验的第16周末处死,处理同造模组.组间比较采用单因素方差分析.结果:纳入Balb/c雌性小鼠100只,实验中造模组共23只小鼠死亡,多为急性和亚急性死亡.对照组全部成活.①灌胃初期,造模组小鼠出现精神萎靡等现象,实验开始4周后上述症状减轻,对照组小鼠则食欲正常,无嗜睡现象.②在实验刚开始1周时小鼠体质量(15.67±0.98)g,与实验开始时(16.38±0.58)g相比呈明显负增长(P＜0.05).第4,8,12,16周称质量时,造模组小鼠体质量[(16.17±0.91),(17.23±1.39),(18.27±0.85),(19.31±0.95)g]均明显低于对照组[(18.31±0.57),(19.52±0.85),(20.56±0.86),(21.41±0.95)g],(P＜0.05).③对照组小鼠肝脏表面光滑细润、色红等.造模组小鼠肝脏色泽较正常肝脏暗淡,表面充血,肝脏呈增大趋势.造模组小鼠的肝重比(肝脏湿重/小鼠体质量×100%)均大于对照组.④造模组4周时可见轻度酒精性脂肪肝病理改变,12周时酒精性肝炎改变加重并出现了纤维组织增生,16周时肝纤维化已明显形成.⑤不同时间点与对照组相比,血清中天冬氨酸氨基转氨酶、丙氨酸氨基转氨酶、天冬氨酸氨基转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶、三酰甘油均呈升高的趋势:造模第8周后,天冬氨酸氨基转氨酶和三酰甘油的水平均逐步增高,尤其以天冬氨酸氨基转氨酶升高明显.⑥小鼠血清肝纤维化指标的变化:造模第8周后血清中透明质酸和层粘连蛋白的水平均逐步增高,与对照组相比,差异均有显著性意义.结论:应用酒精灌胃法可成功建立小鼠酒精性肝纤维化模型,为骨髓衍生肝干细胞的移植提供了前期的实验研究.
目的:建立適閤骨髓衍生肝榦細胞移植的小鼠酒精性肝纖維化模型,為移植骨髓衍生肝榦細胞對酒精性肝損傷脩複的研究提供進一步探討的價值.方法:實驗于2006-02/06在南方醫科大學實驗動物中心完成.取Balb/c雌性小鼠100隻,SPF級,5～6週齡,體質量15～18 g,隨機區組法分為造模組92隻,對照組8隻.用白酒灌胃法建立小鼠酒精性肝纖維化模型.造模組于灌胃的第4,8,12,16週末分彆隨機選取6隻小鼠,眼毬採血後,頸椎脫臼處死,取齣肝髒,以100 g/L的甲醛固定,石蠟包埋切片,囌木精-伊紅染色和苦味痠-痠性複紅染色,光鏡觀察病理變化.血標本用于測定生化及肝纖維化指標.對照組以等量的蒸餾水灌胃,于實驗的第16週末處死,處理同造模組.組間比較採用單因素方差分析.結果:納入Balb/c雌性小鼠100隻,實驗中造模組共23隻小鼠死亡,多為急性和亞急性死亡.對照組全部成活.①灌胃初期,造模組小鼠齣現精神萎靡等現象,實驗開始4週後上述癥狀減輕,對照組小鼠則食欲正常,無嗜睡現象.②在實驗剛開始1週時小鼠體質量(15.67±0.98)g,與實驗開始時(16.38±0.58)g相比呈明顯負增長(P＜0.05).第4,8,12,16週稱質量時,造模組小鼠體質量[(16.17±0.91),(17.23±1.39),(18.27±0.85),(19.31±0.95)g]均明顯低于對照組[(18.31±0.57),(19.52±0.85),(20.56±0.86),(21.41±0.95)g],(P＜0.05).③對照組小鼠肝髒錶麵光滑細潤、色紅等.造模組小鼠肝髒色澤較正常肝髒暗淡,錶麵充血,肝髒呈增大趨勢.造模組小鼠的肝重比(肝髒濕重/小鼠體質量×100%)均大于對照組.④造模組4週時可見輕度酒精性脂肪肝病理改變,12週時酒精性肝炎改變加重併齣現瞭纖維組織增生,16週時肝纖維化已明顯形成.⑤不同時間點與對照組相比,血清中天鼕氨痠氨基轉氨酶、丙氨痠氨基轉氨酶、天鼕氨痠氨基轉氨酶/丙氨痠氨基轉氨酶、三酰甘油均呈升高的趨勢:造模第8週後,天鼕氨痠氨基轉氨酶和三酰甘油的水平均逐步增高,尤其以天鼕氨痠氨基轉氨酶升高明顯.⑥小鼠血清肝纖維化指標的變化:造模第8週後血清中透明質痠和層粘連蛋白的水平均逐步增高,與對照組相比,差異均有顯著性意義.結論:應用酒精灌胃法可成功建立小鼠酒精性肝纖維化模型,為骨髓衍生肝榦細胞的移植提供瞭前期的實驗研究.
목적:건립괄합골수연생간간세포이식적소서주정성간섬유화모형,위이식골수연생간간세포대주정성간손상수복적연구제공진일보탐토적개치.방법:실험우2006-02/06재남방의과대학실험동물중심완성.취Balb/c자성소서100지,SPF급,5～6주령,체질량15～18 g,수궤구조법분위조모조92지,대조조8지.용백주관위법건립소서주정성간섬유화모형.조모조우관위적제4,8,12,16주말분별수궤선취6지소서,안구채혈후,경추탈구처사,취출간장,이100 g/L적갑철고정,석사포매절편,소목정-이홍염색화고미산-산성복홍염색,광경관찰병리변화.혈표본용우측정생화급간섬유화지표.대조조이등량적증류수관위,우실험적제16주말처사,처리동조모조.조간비교채용단인소방차분석.결과:납입Balb/c자성소서100지,실험중조모조공23지소서사망,다위급성화아급성사망.대조조전부성활.①관위초기,조모조소서출현정신위미등현상,실험개시4주후상술증상감경,대조조소서칙식욕정상,무기수현상.②재실험강개시1주시소서체질량(15.67±0.98)g,여실험개시시(16.38±0.58)g상비정명현부증장(P＜0.05).제4,8,12,16주칭질량시,조모조소서체질량[(16.17±0.91),(17.23±1.39),(18.27±0.85),(19.31±0.95)g]균명현저우대조조[(18.31±0.57),(19.52±0.85),(20.56±0.86),(21.41±0.95)g],(P＜0.05).③대조조소서간장표면광활세윤、색홍등.조모조소서간장색택교정상간장암담,표면충혈,간장정증대추세.조모조소서적간중비(간장습중/소서체질량×100%)균대우대조조.④조모조4주시가견경도주정성지방간병리개변,12주시주정성간염개변가중병출현료섬유조직증생,16주시간섬유화이명현형성.⑤불동시간점여대조조상비,혈청중천동안산안기전안매、병안산안기전안매、천동안산안기전안매/병안산안기전안매、삼선감유균정승고적추세:조모제8주후,천동안산안기전안매화삼선감유적수평균축보증고,우기이천동안산안기전안매승고명현.⑥소서혈청간섬유화지표적변화:조모제8주후혈청중투명질산화층점련단백적수평균축보증고,여대조조상비,차이균유현저성의의.결론:응용주정관위법가성공건립소서주정성간섬유화모형,위골수연생간간세포적이식제공료전기적실험연구.
