中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2007年
6期
430-435
,共6页
王宗耀%王胜昌%胡建华%高诚
王宗耀%王勝昌%鬍建華%高誠
왕종요%왕성창%호건화%고성
仙台病毒%F基因%克隆%诱导表达
仙檯病毒%F基因%剋隆%誘導錶達
선태병독%F기인%극륭%유도표체
目的 利用原核表达系统表达仙台病毒(Sendai Virus)F蛋白主要抗原片段FP(S),并对表达产物进行免疫学初步研究.方法 根据GenBank公布的仙台病毒F蛋白(gi:9627219)的基因序列设计特异性引物,通过RT-PCR扩增出F基因的主要抗原片段FP(S),插入pMD-18-T载体中,鉴定正确后克隆入pQE31原核表达载体中,将鉴定正确的pQE31-FP(S)转化大肠埃希菌M15,IPTG诱导表达,对大肠埃希菌裂解物进行SDS-PAGE和Western-blot验证.结果 大肠埃希菌表达的FP(S)相对分子质量约26×103,与预期相符;能与SeV阳性血清发生特异性反应,出现单一条带.结论 原核表达的FP(S)蛋白有良好的抗原性,为检测仙台病毒抗体的ELISA检测方法的研究奠定了基础.
目的 利用原覈錶達繫統錶達仙檯病毒(Sendai Virus)F蛋白主要抗原片段FP(S),併對錶達產物進行免疫學初步研究.方法 根據GenBank公佈的仙檯病毒F蛋白(gi:9627219)的基因序列設計特異性引物,通過RT-PCR擴增齣F基因的主要抗原片段FP(S),插入pMD-18-T載體中,鑒定正確後剋隆入pQE31原覈錶達載體中,將鑒定正確的pQE31-FP(S)轉化大腸埃希菌M15,IPTG誘導錶達,對大腸埃希菌裂解物進行SDS-PAGE和Western-blot驗證.結果 大腸埃希菌錶達的FP(S)相對分子質量約26×103,與預期相符;能與SeV暘性血清髮生特異性反應,齣現單一條帶.結論 原覈錶達的FP(S)蛋白有良好的抗原性,為檢測仙檯病毒抗體的ELISA檢測方法的研究奠定瞭基礎.
목적 이용원핵표체계통표체선태병독(Sendai Virus)F단백주요항원편단FP(S),병대표체산물진행면역학초보연구.방법 근거GenBank공포적선태병독F단백(gi:9627219)적기인서렬설계특이성인물,통과RT-PCR확증출F기인적주요항원편단FP(S),삽입pMD-18-T재체중,감정정학후극륭입pQE31원핵표체재체중,장감정정학적pQE31-FP(S)전화대장애희균M15,IPTG유도표체,대대장애희균렬해물진행SDS-PAGE화Western-blot험증.결과 대장애희균표체적FP(S)상대분자질량약26×103,여예기상부;능여SeV양성혈청발생특이성반응,출현단일조대.결론 원핵표체적FP(S)단백유량호적항원성,위검측선태병독항체적ELISA검측방법적연구전정료기출.
