CAJ | 학술논문

目的研究RNA干扰(RNAi)对大鼠血管平滑肌细胞磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)p110β亚单位(PIK3cb)基因表达的干扰效应.方法雄性SD大鼠150只,均行自体颈外静脉-颈总动脉移植手术,随机数字分组法分为6组: 空白对照组(25%空白Pluronic F-127)、shRNA-1组、shRNA-2组、1/2(shRNA-1+shRNA-2)组、阴性对照组(无序质粒)和阳性对照组(渥曼青霉素),每组25只.3个转染组[shRNA-1组、shRNA-2组及1/2(shRNA-1+shRNA-2)组]通过Pluronic F-127缓释系统将shRNA均匀喷涂于移植静脉周围.分别于术后1、3、7、14及28 d各取5只大鼠取材,采用计算机图像分析法测量管腔内膜厚度及新生内膜面积,Western blot(术后3 d)及免疫组化染色检测细胞增殖情况.结果术后3、7、14及28 d时,3个转染组血管内膜厚度均较空白对照组及阴性对照组明显减少(P＜0.05); 而新生内膜面积3个转染组(除shRNA-2组第3、7 d)于术后1 d起即开始明显减少(P<0.05).免疫组化染色结果示术后各时间点3个转染组PCNA阳性细胞面积百分比显著低于空白对照组及阴性对照组(P＜0.05).Western blot检测结果示术后3 d 3个转染组PCNA蛋白表达明显低于空白对照组及阴性对照组(P＜0.05).各时间点空白对照组与阴性对照组血管内膜增生情况及PCNA表达情况差异无统计学意义(P>0.05).结论 shRNA真核表达载体转染入移植静脉后能有效抑制管壁平滑肌细胞增殖,是一种防治移植静脉狭窄的基因疗法.
목적 연구RNA간우(RNAi)대대서혈관평활기세포린지선기순-3-격매(PI3K)p110β아단위(PIK3cb)기인표체적간우효응.방법 웅성SD대서150지,균행자체경외정맥-경총동맥이식수술,수궤수자분조법분위6조: 공백대조조(25%공백Pluronic F-127)、shRNA-1조、shRNA-2조、1/2(shRNA-1+shRNA-2)조、음성대조조(무서질립)화양성대조조(악만청매소),매조25지.3개전염조[shRNA-1조、shRNA-2조급1/2(shRNA-1+shRNA-2)조]통과Pluronic F-127완석계통장shRNA균균분도우이식정맥주위.분별우술후1、3、7、14급28 d각취5지대서취재,채용계산궤도상분석법측량관강내막후도급신생내막면적,Western blot(술후3 d)급면역조화염색검측세포증식정황.결과 술후3、7、14급28 d시,3개전염조혈관내막후도균교공백대조조급음성대조조명현감소(P＜0.05); 이신생내막면적3개전염조(제shRNA-2조제3、7 d)우술후1 d기즉개시명현감소(P<0.05).면역조화염색결과 시술후각시간점3개전염조PCNA양성세포면적백분비현저저우공백대조조급음성대조조(P＜0.05).Western blot검측결과 시술후3 d 3개전염조PCNA단백표체명현저우공백대조조급음성대조조(P＜0.05).각시간점공백대조조여음성대조조혈관내막증생정황급PCNA표체정황차이무통계학의의(P>0.05).결론 shRNA진핵표체재체전염입이식정맥후능유효억제관벽평활기세포증식,시일충방치이식정맥협착적기인요법.