实用临床医药杂志
實用臨床醫藥雜誌
실용림상의약잡지
JOURNAL OF JIANGSU CLINICAL MEDICINE
2008年
9期
43-45,49
,共4页
朱剑锋%张广森%龚凡杰%李睿娟
硃劍鋒%張廣森%龔凡傑%李睿娟
주검봉%장엄삼%공범걸%리예연
电穿孔%K562细胞%转染%优化
電穿孔%K562細胞%轉染%優化
전천공%K562세포%전염%우화
目的 以绿色荧光蛋白(GFP)为观察指标优化K562细胞的电穿孔基因转染条件.方法 通过改变悬液体积、温度及缓冲液、质粒浓度等转染条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒DNA转入K562细胞,通过流式细胞仪和荧光显微镜观察转染效率.结果 ①在电压250 V、电容950ìF的条件下,K 562细胞得到58.6%的最大转染率.②应用0.4 mL细胞悬液体积,当质粒浓度≥20ìg/mL时可得到较高的转染效率.③温度和缓冲液中的血清成分对电穿孔效率影响不大.结论 电穿孔是一种高效的基因转染法,通过优化条件,可提高转染率.
目的 以綠色熒光蛋白(GFP)為觀察指標優化K562細胞的電穿孔基因轉染條件.方法 通過改變懸液體積、溫度及緩遲液、質粒濃度等轉染條件,採用不同條件組閤後用電穿孔法將質粒DNA轉入K562細胞,通過流式細胞儀和熒光顯微鏡觀察轉染效率.結果 ①在電壓250 V、電容950ìF的條件下,K 562細胞得到58.6%的最大轉染率.②應用0.4 mL細胞懸液體積,噹質粒濃度≥20ìg/mL時可得到較高的轉染效率.③溫度和緩遲液中的血清成分對電穿孔效率影響不大.結論 電穿孔是一種高效的基因轉染法,通過優化條件,可提高轉染率.
목적 이록색형광단백(GFP)위관찰지표우화K562세포적전천공기인전염조건.방법 통과개변현액체적、온도급완충액、질립농도등전염조건,채용불동조건조합후용전천공법장질립DNA전입K562세포,통과류식세포의화형광현미경관찰전염효솔.결과 ①재전압250 V、전용950ìF적조건하,K 562세포득도58.6%적최대전염솔.②응용0.4 mL세포현액체적,당질립농도≥20ìg/mL시가득도교고적전염효솔.③온도화완충액중적혈청성분대전천공효솔영향불대.결론 전천공시일충고효적기인전염법,통과우화조건,가제고전염솔.
