安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
33期
14422-14424,14430
,共4页
葛艳丽%慈海鑫%唐利洲%林恭华%苏建平
葛豔麗%慈海鑫%唐利洲%林恭華%囌建平
갈염려%자해흠%당리주%림공화%소건평
高原鼠兔%ISSR%优化PCR
高原鼠兔%ISSR%優化PCR
고원서토%ISSR%우화PCR
[目的]筛选和优化高原鼠兔(Ochotona curzoniae)适宜的ISSR反应体系,以在对高原鼠兔进行ISSR分析时获得清晰和多态性好的扩增结果.[方法]以高原鼠兔基因组DNA为模板,通过单因素试验,对体系中的模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq酶用量、引物用量、退火温度进行探讨.[结果]结果表明,高原鼠兔ISSR-PCR扩增的最佳条件为:25 μl PCR反应体系,其中4 μl DNA 模板,1.5 mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTPs,1.25 U Taq聚合酶,1.5 μmol/L引物,复性温度45~60 ℃(退火温度随引物不同而确定).用11条引物进行了PCR扩增,筛选出效果较好的6条引物.[结论]该反应体系的建立为鼠兔遗传多样性和分子系统学研究提供技术支持.
[目的]篩選和優化高原鼠兔(Ochotona curzoniae)適宜的ISSR反應體繫,以在對高原鼠兔進行ISSR分析時穫得清晰和多態性好的擴增結果.[方法]以高原鼠兔基因組DNA為模闆,通過單因素試驗,對體繫中的模闆濃度、Mg2+濃度、dNTPs濃度、Taq酶用量、引物用量、退火溫度進行探討.[結果]結果錶明,高原鼠兔ISSR-PCR擴增的最佳條件為:25 μl PCR反應體繫,其中4 μl DNA 模闆,1.5 mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTPs,1.25 U Taq聚閤酶,1.5 μmol/L引物,複性溫度45~60 ℃(退火溫度隨引物不同而確定).用11條引物進行瞭PCR擴增,篩選齣效果較好的6條引物.[結論]該反應體繫的建立為鼠兔遺傳多樣性和分子繫統學研究提供技術支持.
[목적]사선화우화고원서토(Ochotona curzoniae)괄의적ISSR반응체계,이재대고원서토진행ISSR분석시획득청석화다태성호적확증결과.[방법]이고원서토기인조DNA위모판,통과단인소시험,대체계중적모판농도、Mg2+농도、dNTPs농도、Taq매용량、인물용량、퇴화온도진행탐토.[결과]결과표명,고원서토ISSR-PCR확증적최가조건위:25 μl PCR반응체계,기중4 μl DNA 모판,1.5 mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTPs,1.25 U Taq취합매,1.5 μmol/L인물,복성온도45~60 ℃(퇴화온도수인물불동이학정).용11조인물진행료PCR확증,사선출효과교호적6조인물.[결론]해반응체계적건립위서토유전다양성화분자계통학연구제공기술지지.
