CAJ | 학술논문

采用绵羊(Bos gagrus)体细胞带下注入体外成熟的卵母细胞构建重构胚,比较了不同的融合和化学激活前培养时间对重构胚融合和发育的影响.融合前培养1h,比较不同的激活前培养时间,发现各组重构胚卵裂率、桑棋胚率和囊胚率均无显著差异(P>0.05),但激活前培养2h胚胎完整率(95.81%)高于对照(74.64%),差异显著(P<0.05);激活前培养2h,比较不同的融合前培养时间,发现两组融合率,激活胚胎完整率和囊胚率无显著差异(P>0.05),但融合前培养lh的卵裂率(76.88%)和桑椹胚率(40.63%)显著高于直接融合(64.48%和21.50%)(P<0.05).利用G1和G2培养早期克隆胚胎,将发育至桑椹胚囊胚的胚胎移植到41只受体绵羊,仅1只妊娠但于第104天流产.用5对绵羊微卫星DNA多态性引物对该克隆流产胎儿皮肤成纤维细胞、供体细胞、受体绵羊及一只普通对照母绵羊皮肤成纤维细胞进行微卫星DNA分析,结果表明5对微卫星DNA引物扩增各组细胞DNA,扩增产物经过10%琼脂糖凝胶电泳和银染后,条带均有明显的多态性.条带分析显示,克隆流产胎儿的微卫星DNA指纹与供体细胞完全相同,而不同于其受体母亲和对照绵羊.证明该流产羔羊基因来源于供体细胞,为体细胞克隆绵羊.
채용면양(Bos gagrus)체세포대하주입체외성숙적란모세포구건중구배,비교료불동적융합화화학격활전배양시간대중구배융합화발육적영향.융합전배양1h,비교불동적격활전배양시간,발현각조중구배란렬솔、상기배솔화낭배솔균무현저차이(P>0.05),단격활전배양2h배태완정솔(95.81%)고우대조(74.64%),차이현저(P<0.05);격활전배양2h,비교불동적융합전배양시간,발현량조융합솔,격활배태완정솔화낭배솔무현저차이(P>0.05),단융합전배양lh적란렬솔(76.88%)화상심배솔(40.63%)현저고우직접융합(64.48%화21.50%)(P<0.05).이용G1화G2배양조기극륭배태,장발육지상심배낭배적배태이식도41지수체면양,부1지임신단우제104천유산.용5대면양미위성DNA다태성인물대해극륭유산태인피부성섬유세포、공체세포、수체면양급일지보통대조모면양피부성섬유세포진행미위성DNA분석,결과표명5대미위성DNA인물확증각조세포DNA,확증산물경과10%경지당응효전영화은염후,조대균유명현적다태성.조대분석현시,극륭유산태인적미위성DNA지문여공체세포완전상동,이불동우기수체모친화대조면양.증명해유산고양기인래원우공체세포,위체세포극륭면양.