河南科学
河南科學
하남과학
HENAN SCIENCE
2009年
10期
1219-1223
,共5页
陆琼%谢来峰%王磊%樊晋宇%徐存拴
陸瓊%謝來峰%王磊%樊晉宇%徐存拴
륙경%사래봉%왕뢰%번진우%서존전
大鼠%细胞分离和鉴定%肝卵圆细胞%免疫磁珠%标记蛋白
大鼠%細胞分離和鑒定%肝卵圓細胞%免疫磁珠%標記蛋白
대서%세포분리화감정%간란원세포%면역자주%표기단백
按Higgins等方法制作大鼠2,3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll梯度离心和免疫磁珠分离卵圆细胞(oval cell,OC).用卵圆细胞标志蛋白OC2和OV6的免疫组织化学方法定性、定位再生肝(regeneratinglivet,RL),分散的肝脏细胞及分离的卵圆细胞,用RT-PCR定量卵圆细胞的OC2和OV6mRNA,用蛋白免疫印迹方法定量卵圆细胞的OC2和OV6蛋白.初步证实分离的肝卵圆细胞中,OC2和OV6阳性细胞占96%以上,从PH后各时间点分离的肝卵圆细胞的OC2和OV6 mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离肝卵圆细胞方法具有收率和纯度高、活性好等优点,值得采用.
按Higgins等方法製作大鼠2,3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用兩步灌流法分散肝髒細胞,用60%Percoll梯度離心和免疫磁珠分離卵圓細胞(oval cell,OC).用卵圓細胞標誌蛋白OC2和OV6的免疫組織化學方法定性、定位再生肝(regeneratinglivet,RL),分散的肝髒細胞及分離的卵圓細胞,用RT-PCR定量卵圓細胞的OC2和OV6mRNA,用蛋白免疫印跡方法定量卵圓細胞的OC2和OV6蛋白.初步證實分離的肝卵圓細胞中,OC2和OV6暘性細胞佔96%以上,從PH後各時間點分離的肝卵圓細胞的OC2和OV6 mRNA量穩定,相應的蛋白量亦穩定.錶明改進的分離肝卵圓細胞方法具有收率和純度高、活性好等優點,值得採用.
안Higgins등방법제작대서2,3간절제(parital hepatectomy,PH)모형,용량보관류법분산간장세포,용60%Percoll제도리심화면역자주분리란원세포(oval cell,OC).용란원세포표지단백OC2화OV6적면역조직화학방법정성、정위재생간(regeneratinglivet,RL),분산적간장세포급분리적란원세포,용RT-PCR정량란원세포적OC2화OV6mRNA,용단백면역인적방법정량란원세포적OC2화OV6단백.초보증실분리적간란원세포중,OC2화OV6양성세포점96%이상,종PH후각시간점분리적간란원세포적OC2화OV6 mRNA량은정,상응적단백량역은정.표명개진적분리간란원세포방법구유수솔화순도고、활성호등우점,치득채용.