中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2010年
7期
861-866
,共6页
韩圣娜%陈秋%张雨%角灿武%毛讯%付润芳%张莉蓉
韓聖娜%陳鞦%張雨%角燦武%毛訊%付潤芳%張莉蓉
한골나%진추%장우%각찬무%모신%부윤방%장리용
氟康唑%延迟整流钾电流%HERG钾通道%膜片钳技术%HEK-293细胞%心室肌细胞
氟康唑%延遲整流鉀電流%HERG鉀通道%膜片鉗技術%HEK-293細胞%心室肌細胞
불강서%연지정류갑전류%HERG갑통도%막편겸기술%HEK-293세포%심실기세포
目的 研究氟康唑对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流(IK)和在HEK-293细胞中表达的HERG钾通道的抑制作用.方法 应用酶解法消化豚鼠单个心室肌细胞,观察氟康唑对IK的影响;采用磷酸钙沉淀瞬时转染的方法将HERG基因表达于HEK-293细胞上,观察氟康唑对野生型HERG钾通道电流、激活和失活曲线的影响,以及氟康唑对Y652A和F656C突变型HERG钾通道的作用;IK和HERG电流的记录均采用全细胞膜片钳技术.结果 氟康唑(0.01、0.1、1、3、10、30、100、300和1 000 μmol·L-1)浓度依赖性地抑制IK和HERG钾电流,其IC50值分别为(68.1±21.6)μmol·L-1和(48.2±9.4)μmol·L-1,对HERG钾通道的电压依赖性激活和失活曲线无影响;与野生型(WT)比较,Y652A和F656C突变型可减弱氟康唑对HERG通道的阻断作用.结论 氟康唑能阻断IK和HERG通道,Y652和F656是氟康唑与HERG通道结合的关键位点.
目的 研究氟康唑對豚鼠心室肌細胞延遲整流鉀電流(IK)和在HEK-293細胞中錶達的HERG鉀通道的抑製作用.方法 應用酶解法消化豚鼠單箇心室肌細胞,觀察氟康唑對IK的影響;採用燐痠鈣沉澱瞬時轉染的方法將HERG基因錶達于HEK-293細胞上,觀察氟康唑對野生型HERG鉀通道電流、激活和失活麯線的影響,以及氟康唑對Y652A和F656C突變型HERG鉀通道的作用;IK和HERG電流的記錄均採用全細胞膜片鉗技術.結果 氟康唑(0.01、0.1、1、3、10、30、100、300和1 000 μmol·L-1)濃度依賴性地抑製IK和HERG鉀電流,其IC50值分彆為(68.1±21.6)μmol·L-1和(48.2±9.4)μmol·L-1,對HERG鉀通道的電壓依賴性激活和失活麯線無影響;與野生型(WT)比較,Y652A和F656C突變型可減弱氟康唑對HERG通道的阻斷作用.結論 氟康唑能阻斷IK和HERG通道,Y652和F656是氟康唑與HERG通道結閤的關鍵位點.
목적 연구불강서대돈서심실기세포연지정류갑전류(IK)화재HEK-293세포중표체적HERG갑통도적억제작용.방법 응용매해법소화돈서단개심실기세포,관찰불강서대IK적영향;채용린산개침정순시전염적방법장HERG기인표체우HEK-293세포상,관찰불강서대야생형HERG갑통도전류、격활화실활곡선적영향,이급불강서대Y652A화F656C돌변형HERG갑통도적작용;IK화HERG전류적기록균채용전세포막편겸기술.결과 불강서(0.01、0.1、1、3、10、30、100、300화1 000 μmol·L-1)농도의뢰성지억제IK화HERG갑전류,기IC50치분별위(68.1±21.6)μmol·L-1화(48.2±9.4)μmol·L-1,대HERG갑통도적전압의뢰성격활화실활곡선무영향;여야생형(WT)비교,Y652A화F656C돌변형가감약불강서대HERG통도적조단작용.결론 불강서능조단IK화HERG통도,Y652화F656시불강서여HERG통도결합적관건위점.
