CAJ | 학술논문

目的 :探讨脐带血间充质干细胞(umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)的成骨诱导及与β-磷酸3钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)的生物相容性.方法 :在无菌条件下抽取人脐血,用密度梯度离心的方法获得脐血单个核细胞,接种到含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中.单个核细胞行贴壁培养后,进行细胞形态学观察,绘制细胞生长曲线,分析细胞周期,检测细胞表面抗原;应用条件培养基进行成骨诱导后,应用免疫组织化学方法检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)的表达,应用放免方法分析骨钙素(osteocalcin,OCN)的含量、荧光法检测细胞内钙离子的含量;与β-TCP复合培养后,用扫描电镜检测成骨诱导后的UCB-MSCs与β-TCP的生物相容性.结果 :采用Percoll(1.073g/ml)分离的脐血间充质干细胞大小较为均匀,梭形或星形的成纤维细胞样细胞.细胞生长曲线测定表明接种后第5d细胞进入指数增生期,至第9d后数量减少;流式细胞检测表明50%-70%细胞为CD29、CD45和CD105阳性;成骨诱导后,UCB-MSCs内AKP、培养基中的OCN含量和细胞内钙离子的含量均明显高于对照组(P<0.01);成骨诱导的细胞在β-TCP表面生长良好,细胞周围有白色的钙盐沉积.结论 :UCB-MSCs成骨诱导后具有骨细胞特性,与β-TCP具有良好的生物相容性,可作为骨组织工程的种子细胞.
목적 :탐토제대혈간충질간세포(umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)적성골유도급여β-린산3개(β-tricalcium phosphate,β-TCP)적생물상용성.방법 :재무균조건하추취인제혈,용밀도제도리심적방법획득제혈단개핵세포,접충도함10%태우혈청적DMEM/F12배양기중.단개핵세포행첩벽배양후,진행세포형태학관찰,회제세포생장곡선,분석세포주기,검측세포표면항원;응용조건배양기진행성골유도후,응용면역조직화학방법검측감성린산매(alkaline phosphatase,AKP)적표체,응용방면방법분석골개소(osteocalcin,OCN)적함량、형광법검측세포내개리자적함량;여β-TCP복합배양후,용소묘전경검측성골유도후적UCB-MSCs여β-TCP적생물상용성.결과 :채용Percoll(1.073g/ml)분리적제혈간충질간세포대소교위균균,사형혹성형적성섬유세포양세포.세포생장곡선측정표명접충후제5d세포진입지수증생기,지제9d후수량감소;류식세포검측표명50%-70%세포위CD29、CD45화CD105양성;성골유도후,UCB-MSCs내AKP、배양기중적OCN함량화세포내개리자적함량균명현고우대조조(P<0.01);성골유도적세포재β-TCP표면생장량호,세포주위유백색적개염침적.결론 :UCB-MSCs성골유도후구유골세포특성,여β-TCP구유량호적생물상용성,가작위골조직공정적충자세포.