CAJ | 학술논문

目的:探索快速建立肺癌耐药细胞模型的新方法,并探讨肺癌耐药和干细胞的相关性.方法:应用无血清培养联合药物筛选法建立肺腺癌细胞耐药株A549/ADM;MTT法检测其对多种常用化疗药物的耐药程度;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡、ABCB1和ABCG2的表达水平及细胞内多柔比星的浓度;细胞免疫荧光及流式细胞仪通过特异性表面抗原标记法(CD133)检测肿瘤干细胞含量.裸鼠皮下种植瘤试验评估A549/ADM的致瘤性.结果:A549细胞经无血清培养可见细胞球形成;A549/ADM细胞对多柔比星、长春新碱、紫杉醇均产生了耐药,其耐药指数分别为A549的13.167,12.86,3.4倍;与亲代A549相比,耐药株A549/ADM S期细胞比例由(45.76±1.41)% 降低至(23.33±1.32)%,细胞凋亡百分率由(58.23±0.82)% 减少至(16.49±0.77)%;耐药株A549/ADM中ABCB1和ABCG2的表达水平明显增高( P <0.05),且细胞内多柔比星浓度明显低于A549细胞;CD133细胞在A549/ADM和A549中的比例分别为(6.2±0.7)%和(1.9±0.2)%( P <0.05),免疫荧光检测A549/ADM细胞CD133表达水平较A549细胞高;A549/ADM具有高致瘤性.结论:无血清培养联合多柔比星诱导能高效富集肺癌干细胞,成功建立了人肺腺癌A549/ADM多药耐药细胞模型.
목적:탐색쾌속건립폐암내약세포모형적신방법,병탐토폐암내약화간세포적상관성.방법:응용무혈청배양연합약물사선법건립폐선암세포내약주A549/ADM;MTT법검측기대다충상용화료약물적내약정도;류식세포의검측세포주기화조망、ABCB1화ABCG2적표체수평급세포내다유비성적농도;세포면역형광급류식세포의통과특이성표면항원표기법(CD133)검측종류간세포함량.라서피하충식류시험평고A549/ADM적치류성.결과:A549세포경무혈청배양가견세포구형성;A549/ADM세포대다유비성、장춘신감、자삼순균산생료내약,기내약지수분별위A549적13.167,12.86,3.4배;여친대A549상비,내약주A549/ADM S기세포비례유(45.76±1.41)% 강저지(23.33±1.32)%,세포조망백분솔유(58.23±0.82)% 감소지(16.49±0.77)%;내약주A549/ADM중ABCB1화ABCG2적표체수평명현증고( P <0.05),차세포내다유비성농도명현저우A549세포;CD133세포재A549/ADM화A549중적비례분별위(6.2±0.7)%화(1.9±0.2)%( P <0.05),면역형광검측A549/ADM세포CD133표체수평교A549세포고;A549/ADM구유고치류성.결론:무혈청배양연합다유비성유도능고효부집폐암간세포,성공건립료인폐선암A549/ADM다약내약세포모형.