烟草科技
煙草科技
연초과기
TOBACCO SCIENCE & TECHNOLOGY
2011年
10期
65-69
,共5页
张俊祺%刘相兵%罗朝鹏%杨军%宋纪真%尹启生%宋浩
張俊祺%劉相兵%囉朝鵬%楊軍%宋紀真%尹啟生%宋浩
장준기%류상병%라조붕%양군%송기진%윤계생%송호
黄瓜花叶病毒%RT-PCR%检测试剂盒%特异性%稳定性%灵敏度
黃瓜花葉病毒%RT-PCR%檢測試劑盒%特異性%穩定性%靈敏度
황과화협병독%RT-PCR%검측시제합%특이성%은정성%령민도
为快速准确地检测烟草黄瓜花叶病毒(CMV),根据黄瓜花叶病毒基因组序列相对保守区域设计了一对特异性引物,整合了反转录和PCR反应所需酶和缓冲液,通过反应条件的优化,建立了基于一步法RT-PCR检测烟叶感染CMV的方法,在此基础上组装了检测试剂盒.进一步分析了该试剂盒的特异性、稳定性和检测灵敏度.结果表明,该试剂盒具有很强的特异性、良好的重复性和较高的灵敏度(模板RNA浓度最低达到10 ng量级).初步应用结果显示,在多个烟区采集的病叶样品检测结果均与ELISA检测结果一致,能够成功检测出CMV.
為快速準確地檢測煙草黃瓜花葉病毒(CMV),根據黃瓜花葉病毒基因組序列相對保守區域設計瞭一對特異性引物,整閤瞭反轉錄和PCR反應所需酶和緩遲液,通過反應條件的優化,建立瞭基于一步法RT-PCR檢測煙葉感染CMV的方法,在此基礎上組裝瞭檢測試劑盒.進一步分析瞭該試劑盒的特異性、穩定性和檢測靈敏度.結果錶明,該試劑盒具有很彊的特異性、良好的重複性和較高的靈敏度(模闆RNA濃度最低達到10 ng量級).初步應用結果顯示,在多箇煙區採集的病葉樣品檢測結果均與ELISA檢測結果一緻,能夠成功檢測齣CMV.
위쾌속준학지검측연초황과화협병독(CMV),근거황과화협병독기인조서렬상대보수구역설계료일대특이성인물,정합료반전록화PCR반응소수매화완충액,통과반응조건적우화,건립료기우일보법RT-PCR검측연협감염CMV적방법,재차기출상조장료검측시제합.진일보분석료해시제합적특이성、은정성화검측령민도.결과표명,해시제합구유흔강적특이성、량호적중복성화교고적령민도(모판RNA농도최저체도10 ng량급).초보응용결과현시,재다개연구채집적병협양품검측결과균여ELISA검측결과일치,능구성공검측출CMV.
