CAJ | 학술논문

目的:探讨组蛋白H3乙酰化修饰对心脏发育早期相关转录因子胰岛素基因增强结合蛋白1(Insulin gene enhancer protein 1,Islet-1)的调控作用.方法:体外培养心肌祖细胞,分别用不同浓度组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(Suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)干预(0、0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L),噻唑蓝(Methyl thiazoyl tetrazolium,MTT)比色实验检测SAHA对细胞增殖的影响,筛选出SAHA的合适干预浓度,用Westernblot技术检测心肌祖细胞组蛋白H3乙酰化状态,Real-timePCR检测Islet-1的mRNA表达水平变化,染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)Real-timePCR技术检测Islet-1启动子区组蛋白H3的乙酰化水平.结果:SAHA0.5、1.0μmol/L处理组较对照组细胞增殖率有所提高,但差异没有统计学意义(P＞0.05),SAHA2.0μmol/L处理组与对照组细胞增殖率相当(P＞0.05).SAHA4.0μmol/L处理组与对照组比较,细胞增殖受到抑制(P＜0.05).SAHA2.0μmol/L处理48h后心肌祖细胞H3乙酰化水平与对照组比升高7.23倍(P＜0.05).Islet-1的mRNA表达与对照组比提高了4.68倍(P＜0.05),Islet-1启动子区组蛋白H3乙酰化水平是对照组的2.08倍(P＜0.05).结论:在心肌祖细胞中,组蛋白H3高乙酰化水平促进Islet-1表达,Islet-1受到组蛋白H3乙酰化调控.
목적:탐토조단백H3을선화수식대심장발육조기상관전록인자이도소기인증강결합단백1(Insulin gene enhancer protein 1,Islet-1)적조공작용.방법:체외배양심기조세포,분별용불동농도조단백거을선화매억제제신이선분알이간우산(Suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)간예(0、0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L),새서람(Methyl thiazoyl tetrazolium,MTT)비색실험검측SAHA대세포증식적영향,사선출SAHA적합괄간예농도,용Westernblot기술검측심기조세포조단백H3을선화상태,Real-timePCR검측Islet-1적mRNA표체수평변화,염색질면역공침정(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)Real-timePCR기술검측Islet-1계동자구조단백H3적을선화수평.결과:SAHA0.5、1.0μmol/L처리조교대조조세포증식솔유소제고,단차이몰유통계학의의(P＞0.05),SAHA2.0μmol/L처리조여대조조세포증식솔상당(P＞0.05).SAHA4.0μmol/L처리조여대조조비교,세포증식수도억제(P＜0.05).SAHA2.0μmol/L처리48h후심기조세포H3을선화수평여대조조비승고7.23배(P＜0.05).Islet-1적mRNA표체여대조조비제고료4.68배(P＜0.05),Islet-1계동자구조단백H3을선화수평시대조조적2.08배(P＜0.05).결론:재심기조세포중,조단백H3고을선화수평촉진Islet-1표체,Islet-1수도조단백H3을선화조공.