中国地方病学杂志
中國地方病學雜誌
중국지방병학잡지
CHINESE JOURNAL OF ENDEMIOLOGY
2007年
5期
523-526
,共4页
邹向晖%邹宁%周令望%于维汉
鄒嚮暉%鄒寧%週令望%于維漢
추향휘%추저%주령망%우유한
基因疗法%腺病毒E1蛋白质类%DNA%重组%硫氧还蛋白
基因療法%腺病毒E1蛋白質類%DNA%重組%硫氧還蛋白
기인요법%선병독E1단백질류%DNA%중조%류양환단백
目的 应用基因重组方法 构建携带人硫氧还蛋白(hTRX)基因的复制缺陷型重组腺病毒.方法 用内切酶、RT-PCR、测序方法获得目的基因片段,然后将其cDNA克隆至表达载体pShuttle构建hTRX的重组真核细胞表达载体pShuttle-hTRX,在HeLa细胞中进行瞬时表达检测.从真核表达载体pShuttle-hTRX 切下目的基因,并插入至腺病毒载体构建hTRX的重组腺病毒载体Adeno-hTRX,经PCR方法亦证明了成功构建腺病毒重组体.重组腺病毒在293细胞中扩增、纯化.结果 成功构建了携带人硫氧还蛋白基因的复制缺陷型重组腺病毒,并以多种方法 证实了构建载体的正确性.结论 正确构建的人硫氧还蛋白重组腺病毒载体,可为基因治疗心血管系统疾病打下良好基础.
目的 應用基因重組方法 構建攜帶人硫氧還蛋白(hTRX)基因的複製缺陷型重組腺病毒.方法 用內切酶、RT-PCR、測序方法穫得目的基因片段,然後將其cDNA剋隆至錶達載體pShuttle構建hTRX的重組真覈細胞錶達載體pShuttle-hTRX,在HeLa細胞中進行瞬時錶達檢測.從真覈錶達載體pShuttle-hTRX 切下目的基因,併插入至腺病毒載體構建hTRX的重組腺病毒載體Adeno-hTRX,經PCR方法亦證明瞭成功構建腺病毒重組體.重組腺病毒在293細胞中擴增、純化.結果 成功構建瞭攜帶人硫氧還蛋白基因的複製缺陷型重組腺病毒,併以多種方法 證實瞭構建載體的正確性.結論 正確構建的人硫氧還蛋白重組腺病毒載體,可為基因治療心血管繫統疾病打下良好基礎.
목적 응용기인중조방법 구건휴대인류양환단백(hTRX)기인적복제결함형중조선병독.방법 용내절매、RT-PCR、측서방법획득목적기인편단,연후장기cDNA극륭지표체재체pShuttle구건hTRX적중조진핵세포표체재체pShuttle-hTRX,재HeLa세포중진행순시표체검측.종진핵표체재체pShuttle-hTRX 절하목적기인,병삽입지선병독재체구건hTRX적중조선병독재체Adeno-hTRX,경PCR방법역증명료성공구건선병독중조체.중조선병독재293세포중확증、순화.결과 성공구건료휴대인류양환단백기인적복제결함형중조선병독,병이다충방법 증실료구건재체적정학성.결론 정학구건적인류양환단백중조선병독재체,가위기인치료심혈관계통질병타하량호기출.
