生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2004年
6期
901-905
,共5页
管宝全%张军%罗文新%陈敏%吴婷%程通%夏宁邵
管寶全%張軍%囉文新%陳敏%吳婷%程通%夏寧邵
관보전%장군%라문신%진민%오정%정통%하저소
乙型肝炎病毒%中和抗体%可变区%表达
乙型肝炎病毒%中和抗體%可變區%錶達
을형간염병독%중화항체%가변구%표체
鼠源单克隆抗体MA18/7是特异识别乙型肝炎病毒(HBV)pre-S1抗原的中和抗体.为表达MA18/7的小分子抗体,将MA18/7的重链可变区基因(VH)和轻链可变区(VL)基因分别克隆到原核表达载体pTO-T7进行原核表达.结果VH和VL均以包涵体的形式高效表达,包涵体经过变性、复性及金属离子亲和纯化后获得纯度＞90%的重组抗体片段.生物传感器、竞争ELISA和间接ELISA测定均显示,VH或VL均不能结合相应抗原,但二者体外混合后可迅速非共价结合形成具有良好活性的可变区抗体FV,表明MA18/7的抗原结合活性区由重链可变区和轻链可变区共同组成.
鼠源單剋隆抗體MA18/7是特異識彆乙型肝炎病毒(HBV)pre-S1抗原的中和抗體.為錶達MA18/7的小分子抗體,將MA18/7的重鏈可變區基因(VH)和輕鏈可變區(VL)基因分彆剋隆到原覈錶達載體pTO-T7進行原覈錶達.結果VH和VL均以包涵體的形式高效錶達,包涵體經過變性、複性及金屬離子親和純化後穫得純度＞90%的重組抗體片段.生物傳感器、競爭ELISA和間接ELISA測定均顯示,VH或VL均不能結閤相應抗原,但二者體外混閤後可迅速非共價結閤形成具有良好活性的可變區抗體FV,錶明MA18/7的抗原結閤活性區由重鏈可變區和輕鏈可變區共同組成.
서원단극륭항체MA18/7시특이식별을형간염병독(HBV)pre-S1항원적중화항체.위표체MA18/7적소분자항체,장MA18/7적중련가변구기인(VH)화경련가변구(VL)기인분별극륭도원핵표체재체pTO-T7진행원핵표체.결과VH화VL균이포함체적형식고효표체,포함체경과변성、복성급금속리자친화순화후획득순도＞90%적중조항체편단.생물전감기、경쟁ELISA화간접ELISA측정균현시,VH혹VL균불능결합상응항원,단이자체외혼합후가신속비공개결합형성구유량호활성적가변구항체FV,표명MA18/7적항원결합활성구유중련가변구화경련가변구공동조성.
