生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2000年
4期
407-411
,共5页
王维荣%刘爱民%钱志康%黄伟达
王維榮%劉愛民%錢誌康%黃偉達
왕유영%류애민%전지강%황위체
青岛海葵强心活性多肽%毕氏酵母%分泌表达
青島海葵彊心活性多肽%畢氏酵母%分泌錶達
청도해규강심활성다태%필씨효모%분비표체
青岛海葵中存在两种具有增强心肌收缩功能的多肽类毒素(分别命名为Ap-QD1和Ap-QD2).通过分析已经得到Ap-QD2的氨基酸序列,按照毕氏酵母的偏爱密码子设计并合成了Ap-QD2的cDNA.将合成cDNA序列通过PCR扩增及一系列分子克隆操作导入毕氏酵母表达载体pPICZαA中,以电穿孔方法转化毕氏酵母GS115和KM71,并进行转化子的表型及高拷贝化筛选.其中的KM71(Muts)的转化子经摇瓶发酵,每升发酵液可表达约20 mg的重组Ap-QD2产物,通过纯化可得到7 mg纯的有天然生物学活性的Ap-QD2基因工程产物.
青島海葵中存在兩種具有增彊心肌收縮功能的多肽類毒素(分彆命名為Ap-QD1和Ap-QD2).通過分析已經得到Ap-QD2的氨基痠序列,按照畢氏酵母的偏愛密碼子設計併閤成瞭Ap-QD2的cDNA.將閤成cDNA序列通過PCR擴增及一繫列分子剋隆操作導入畢氏酵母錶達載體pPICZαA中,以電穿孔方法轉化畢氏酵母GS115和KM71,併進行轉化子的錶型及高拷貝化篩選.其中的KM71(Muts)的轉化子經搖瓶髮酵,每升髮酵液可錶達約20 mg的重組Ap-QD2產物,通過純化可得到7 mg純的有天然生物學活性的Ap-QD2基因工程產物.
청도해규중존재량충구유증강심기수축공능적다태류독소(분별명명위Ap-QD1화Ap-QD2).통과분석이경득도Ap-QD2적안기산서렬,안조필씨효모적편애밀마자설계병합성료Ap-QD2적cDNA.장합성cDNA서렬통과PCR확증급일계렬분자극륭조작도입필씨효모표체재체pPICZαA중,이전천공방법전화필씨효모GS115화KM71,병진행전화자적표형급고고패화사선.기중적KM71(Muts)적전화자경요병발효,매승발효액가표체약20 mg적중조Ap-QD2산물,통과순화가득도7 mg순적유천연생물학활성적Ap-QD2기인공정산물.
