江西医学院学报
江西醫學院學報
강서의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE JIANGXI
2008年
2期
11-14
,共4页
冯九庚%封荣华%段剑%蒋丽萍%洪涛
馮九庚%封榮華%段劍%蔣麗萍%洪濤
풍구경%봉영화%단검%장려평%홍도
缝隙连接蛋白Cx43%RNA干扰%平滑肌细胞%增殖
縫隙連接蛋白Cx43%RNA榦擾%平滑肌細胞%增殖
봉극련접단백Cx43%RNA간우%평활기세포%증식
目的 通过siRNA介导的RNA干扰技术沉默平滑肌细胞缝隙连接蛋白Cx43的表达,观察其对平滑肌细胞增殖的影响.方法 应用阳离子脂质体转染的方法,将化学合成的特异性378siRNA转染平滑肌细胞设为特异性siRNA组,并以转染非特异性siRNA和空白作为对照,半定量RT-PCR法分析转染不同时间(24、48、72、96h)细胞Cx43 mRNA表达水平的变化;同时噻唑蓝(MTT)比色法检测平滑肌细胞增殖,观察转染不同浓度(50、100、150、200nmol/L)378siRNA对细胞增殖的影响.结果 半定量RT-PCR结果显示与非特异性siRNA组及空白对照组相比,转染特异性378siRNA后Cx43 mRNA表达水平显著地下调并呈时间依赖性特点.MTT结果显示与空白对照组相比,转染低浓度(50nmol/L)378siRNA早期(24、48h)OD值开始降低,但差异无统计学意义(P＞0.05),随着特异性siRNA 浓度的升高,OD值显著降低(P＜0.05).200nmol/L 378siRNA转染72、96h对细胞的增殖抑制率分别为32.51%、42.67%(P＜0.01),并呈浓度依赖性特点;而作为阴性对照的siRNA转染后则无上述作用.结论 转染特异性378siRNA可有效沉默平滑肌细胞缝隙连接Cx43mRNA 的表达并抑制平滑肌细胞的增殖.
目的 通過siRNA介導的RNA榦擾技術沉默平滑肌細胞縫隙連接蛋白Cx43的錶達,觀察其對平滑肌細胞增殖的影響.方法 應用暘離子脂質體轉染的方法,將化學閤成的特異性378siRNA轉染平滑肌細胞設為特異性siRNA組,併以轉染非特異性siRNA和空白作為對照,半定量RT-PCR法分析轉染不同時間(24、48、72、96h)細胞Cx43 mRNA錶達水平的變化;同時噻唑藍(MTT)比色法檢測平滑肌細胞增殖,觀察轉染不同濃度(50、100、150、200nmol/L)378siRNA對細胞增殖的影響.結果 半定量RT-PCR結果顯示與非特異性siRNA組及空白對照組相比,轉染特異性378siRNA後Cx43 mRNA錶達水平顯著地下調併呈時間依賴性特點.MTT結果顯示與空白對照組相比,轉染低濃度(50nmol/L)378siRNA早期(24、48h)OD值開始降低,但差異無統計學意義(P＞0.05),隨著特異性siRNA 濃度的升高,OD值顯著降低(P＜0.05).200nmol/L 378siRNA轉染72、96h對細胞的增殖抑製率分彆為32.51%、42.67%(P＜0.01),併呈濃度依賴性特點;而作為陰性對照的siRNA轉染後則無上述作用.結論 轉染特異性378siRNA可有效沉默平滑肌細胞縫隙連接Cx43mRNA 的錶達併抑製平滑肌細胞的增殖.
목적 통과siRNA개도적RNA간우기술침묵평활기세포봉극련접단백Cx43적표체,관찰기대평활기세포증식적영향.방법 응용양리자지질체전염적방법,장화학합성적특이성378siRNA전염평활기세포설위특이성siRNA조,병이전염비특이성siRNA화공백작위대조,반정량RT-PCR법분석전염불동시간(24、48、72、96h)세포Cx43 mRNA표체수평적변화;동시새서람(MTT)비색법검측평활기세포증식,관찰전염불동농도(50、100、150、200nmol/L)378siRNA대세포증식적영향.결과 반정량RT-PCR결과현시여비특이성siRNA조급공백대조조상비,전염특이성378siRNA후Cx43 mRNA표체수평현저지하조병정시간의뢰성특점.MTT결과현시여공백대조조상비,전염저농도(50nmol/L)378siRNA조기(24、48h)OD치개시강저,단차이무통계학의의(P＞0.05),수착특이성siRNA 농도적승고,OD치현저강저(P＜0.05).200nmol/L 378siRNA전염72、96h대세포적증식억제솔분별위32.51%、42.67%(P＜0.01),병정농도의뢰성특점;이작위음성대조적siRNA전염후칙무상술작용.결론 전염특이성378siRNA가유효침묵평활기세포봉극련접Cx43mRNA 적표체병억제평활기세포적증식.
