作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2009年
2期
370-374
,共5页
马炳田%曲广林%黄文娟%林瑜凡%李仕贵
馬炳田%麯廣林%黃文娟%林瑜凡%李仕貴
마병전%곡엄림%황문연%림유범%리사귀
大豆%立枯丝核菌%致病性%G蛋白β亚基%信号传导
大豆%立枯絲覈菌%緻病性%G蛋白β亞基%信號傳導
대두%립고사핵균%치병성%G단백β아기%신호전도
由立枯丝核菌[Rhizoctonia solani Kuhn,有性世代:Thanatephorus cucumeris(Frank)Donk]引起的大豆纹枯病(soybean sharp eyespot)是一种重要病害.G蛋白β亚基(guanine nucleotide binding protein beta-subunit)作为重要的信号传导因子,在植物病原菌致病分子机制中起着重要作用.为了解G蛋白β亚基基因的结构与功能,根据同源物种G蛋白β亚基相关序列设计引物,利用PCR和RT-PCR技术克隆了大豆立枯丝核菌G蛋白β亚基的基因序列和开放阅读框(G-protein beta-subunit of soybean Rhizoctonia solani,简写为gbsrs1,GenBank登录号为EU663628).该片段全长1 864 bp,含有4个内含子和5个外显子;开放阅读框(ORF)长1 047 bp,编码348氨基酸残基,与多种真菌G蛋白β亚基的氨基酸序列相似程度较高,达79.72%-99-43%;该蛋白质具有2个α-螺旋和7个β-折叠的二级结构,形成无规则卷曲连接的桶形三级结构.将gbsrs1的ORF连接于原核融合表达载体pGEX-4T-2中,经IPTG诱导,获得了相应蛋白的表达.gbsrs1的克隆和特性研究为了解大豆立枯丝核菌的致病机理、有效防治纹枯病奠定了基础.
由立枯絲覈菌[Rhizoctonia solani Kuhn,有性世代:Thanatephorus cucumeris(Frank)Donk]引起的大豆紋枯病(soybean sharp eyespot)是一種重要病害.G蛋白β亞基(guanine nucleotide binding protein beta-subunit)作為重要的信號傳導因子,在植物病原菌緻病分子機製中起著重要作用.為瞭解G蛋白β亞基基因的結構與功能,根據同源物種G蛋白β亞基相關序列設計引物,利用PCR和RT-PCR技術剋隆瞭大豆立枯絲覈菌G蛋白β亞基的基因序列和開放閱讀框(G-protein beta-subunit of soybean Rhizoctonia solani,簡寫為gbsrs1,GenBank登錄號為EU663628).該片段全長1 864 bp,含有4箇內含子和5箇外顯子;開放閱讀框(ORF)長1 047 bp,編碼348氨基痠殘基,與多種真菌G蛋白β亞基的氨基痠序列相似程度較高,達79.72%-99-43%;該蛋白質具有2箇α-螺鏇和7箇β-摺疊的二級結構,形成無規則捲麯連接的桶形三級結構.將gbsrs1的ORF連接于原覈融閤錶達載體pGEX-4T-2中,經IPTG誘導,穫得瞭相應蛋白的錶達.gbsrs1的剋隆和特性研究為瞭解大豆立枯絲覈菌的緻病機理、有效防治紋枯病奠定瞭基礎.
유립고사핵균[Rhizoctonia solani Kuhn,유성세대:Thanatephorus cucumeris(Frank)Donk]인기적대두문고병(soybean sharp eyespot)시일충중요병해.G단백β아기(guanine nucleotide binding protein beta-subunit)작위중요적신호전도인자,재식물병원균치병분자궤제중기착중요작용.위료해G단백β아기기인적결구여공능,근거동원물충G단백β아기상관서렬설계인물,이용PCR화RT-PCR기술극륭료대두립고사핵균G단백β아기적기인서렬화개방열독광(G-protein beta-subunit of soybean Rhizoctonia solani,간사위gbsrs1,GenBank등록호위EU663628).해편단전장1 864 bp,함유4개내함자화5개외현자;개방열독광(ORF)장1 047 bp,편마348안기산잔기,여다충진균G단백β아기적안기산서렬상사정도교고,체79.72%-99-43%;해단백질구유2개α-라선화7개β-절첩적이급결구,형성무규칙권곡련접적통형삼급결구.장gbsrs1적ORF련접우원핵융합표체재체pGEX-4T-2중,경IPTG유도,획득료상응단백적표체.gbsrs1적극륭화특성연구위료해대두립고사핵균적치병궤리、유효방치문고병전정료기출.