中国兽医科学
中國獸醫科學
중국수의과학
VETERINARY SCIENCE IN CHINA
2009年
8期
659-664
,共6页
刘建刚%刘光远%田占成%谢俊仁%龚真莉%张丽艳
劉建剛%劉光遠%田佔成%謝俊仁%龔真莉%張麗豔
류건강%류광원%전점성%사준인%공진리%장려염
长角血蜱%抑制消减杂交(SSH)%cDNA文库
長角血蜱%抑製消減雜交(SSH)%cDNA文庫
장각혈비%억제소감잡교(SSH)%cDNA문고
为构建长角血蜱雄蜱抑制消减杂交cDNA文库,获得长角血蜱雄性成蜱在半饱血状态下的特异表达基因,用抑制消减杂交方法构建以pGEM-T Easy为载体的长角血蜱半饱血雄蜱全蜱cDNA文库,测序并进行生物信息学分析.以新合成的长角血蜱饥饿和半饱血雄蜱cDNA第一链为模板,用RT-PCR方法对从文库中挑选的5个表达序列标签(EST)进行鉴定.初步获得18个EST,BlastX分析显示,所得cDNA编码的功能性蛋白主要包括信号传导、组织形态形成、转录调节和糖类代谢等相关蛋白.RT-PCR鉴定结果显示,随机挑选的5个新EST中有3个在半饱血状态下差异表达.结果表明,成功地构建了长角血蜱雄性全蜱抑制消减杂交文库,获得了有潜在生物学功能的EST.
為構建長角血蜱雄蜱抑製消減雜交cDNA文庫,穫得長角血蜱雄性成蜱在半飽血狀態下的特異錶達基因,用抑製消減雜交方法構建以pGEM-T Easy為載體的長角血蜱半飽血雄蜱全蜱cDNA文庫,測序併進行生物信息學分析.以新閤成的長角血蜱饑餓和半飽血雄蜱cDNA第一鏈為模闆,用RT-PCR方法對從文庫中挑選的5箇錶達序列標籤(EST)進行鑒定.初步穫得18箇EST,BlastX分析顯示,所得cDNA編碼的功能性蛋白主要包括信號傳導、組織形態形成、轉錄調節和糖類代謝等相關蛋白.RT-PCR鑒定結果顯示,隨機挑選的5箇新EST中有3箇在半飽血狀態下差異錶達.結果錶明,成功地構建瞭長角血蜱雄性全蜱抑製消減雜交文庫,穫得瞭有潛在生物學功能的EST.
위구건장각혈비웅비억제소감잡교cDNA문고,획득장각혈비웅성성비재반포혈상태하적특이표체기인,용억제소감잡교방법구건이pGEM-T Easy위재체적장각혈비반포혈웅비전비cDNA문고,측서병진행생물신식학분석.이신합성적장각혈비기아화반포혈웅비cDNA제일련위모판,용RT-PCR방법대종문고중도선적5개표체서렬표첨(EST)진행감정.초보획득18개EST,BlastX분석현시,소득cDNA편마적공능성단백주요포괄신호전도、조직형태형성、전록조절화당류대사등상관단백.RT-PCR감정결과현시,수궤도선적5개신EST중유3개재반포혈상태하차이표체.결과표명,성공지구건료장각혈비웅성전비억제소감잡교문고,획득료유잠재생물학공능적EST.
