郑州大学学报（医学版）
鄭州大學學報（醫學版）
정주대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2009年
6期
1146-1150
,共5页
刘康栋%秦珍珠%路静%杨洪艳%黄幼田%郑智敏%赵明耀%董子明
劉康棟%秦珍珠%路靜%楊洪豔%黃幼田%鄭智敏%趙明耀%董子明
류강동%진진주%로정%양홍염%황유전%정지민%조명요%동자명
结肠癌%树突状细胞%肿瘤微环境%SW620细胞
結腸癌%樹突狀細胞%腫瘤微環境%SW620細胞
결장암%수돌상세포%종류미배경%SW620세포
目的:探讨高转移结肠癌细胞SW620分泌的可溶性细胞因子营造的微环境对人单个核细胞来源的树突状细胞(DC)分化发育的影响,为DC疫苗在结肠癌患者中的临床应用提供依据.方法:密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,加入含重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4的RPMI 1640培养液诱导培养,第2天对照组同前培养,实验组在此基础上加入SW620条件培养基,均隔天半量换液,第4天加入超声破碎法制备的SW620抗原,第6天加入脂多糖.第8天收集对照组正常成熟DC和实验组肿瘤相关DC(TADC).显微镜观察其形态,流式细胞仪检测其免疫表型,RT-PCR检测CD1a mRNA的表达,混合淋巴细胞反应及体外杀伤活性实验检测其刺激T细胞增殖及杀伤能力.结果:TADC与正常成熟DC相比,细胞形态明显受到抑制.流式细胞仪检测PBMC、正常DC及TADC CD86及CD1a分子阳性率,差异均有统计学意义(F分别为46.95及19.09,P<0.001).与正常DC比较,TADC CD86分子阳性率由(68.56±8.04)%降为(42.41±10.87)%,CD1a分子阳性率由(55.71±12.12)%降为(26.60±12.03)%(P均<0.05);CD1a基因表达降低,体外刺激T细胞增殖[(112.53±7.16)%懈.(91.26±6.62)%]及杀伤能力[(62.42±0.57)%vs.(50.37±2.21)%]均下降(t分别为6.17、17.41.P均<0.001).结论:SW620条件培养基所营造的微环境对DC的诱导分化及其功能有明显的抑制作用,这可能是肿瘤细胞逃避机体免疫监视的机制之一.
目的:探討高轉移結腸癌細胞SW620分泌的可溶性細胞因子營造的微環境對人單箇覈細胞來源的樹突狀細胞(DC)分化髮育的影響,為DC疫苗在結腸癌患者中的臨床應用提供依據.方法:密度梯度離心法分離人外週血單箇覈細胞,加入含重組人粒細胞一巨噬細胞集落刺激因子和重組人白細胞介素-4的RPMI 1640培養液誘導培養,第2天對照組同前培養,實驗組在此基礎上加入SW620條件培養基,均隔天半量換液,第4天加入超聲破碎法製備的SW620抗原,第6天加入脂多糖.第8天收集對照組正常成熟DC和實驗組腫瘤相關DC(TADC).顯微鏡觀察其形態,流式細胞儀檢測其免疫錶型,RT-PCR檢測CD1a mRNA的錶達,混閤淋巴細胞反應及體外殺傷活性實驗檢測其刺激T細胞增殖及殺傷能力.結果:TADC與正常成熟DC相比,細胞形態明顯受到抑製.流式細胞儀檢測PBMC、正常DC及TADC CD86及CD1a分子暘性率,差異均有統計學意義(F分彆為46.95及19.09,P<0.001).與正常DC比較,TADC CD86分子暘性率由(68.56±8.04)%降為(42.41±10.87)%,CD1a分子暘性率由(55.71±12.12)%降為(26.60±12.03)%(P均<0.05);CD1a基因錶達降低,體外刺激T細胞增殖[(112.53±7.16)%懈.(91.26±6.62)%]及殺傷能力[(62.42±0.57)%vs.(50.37±2.21)%]均下降(t分彆為6.17、17.41.P均<0.001).結論:SW620條件培養基所營造的微環境對DC的誘導分化及其功能有明顯的抑製作用,這可能是腫瘤細胞逃避機體免疫鑑視的機製之一.
목적:탐토고전이결장암세포SW620분비적가용성세포인자영조적미배경대인단개핵세포래원적수돌상세포(DC)분화발육적영향,위DC역묘재결장암환자중적림상응용제공의거.방법:밀도제도리심법분리인외주혈단개핵세포,가입함중조인립세포일거서세포집락자격인자화중조인백세포개소-4적RPMI 1640배양액유도배양,제2천대조조동전배양,실험조재차기출상가입SW620조건배양기,균격천반량환액,제4천가입초성파쇄법제비적SW620항원,제6천가입지다당.제8천수집대조조정상성숙DC화실험조종류상관DC(TADC).현미경관찰기형태,류식세포의검측기면역표형,RT-PCR검측CD1a mRNA적표체,혼합림파세포반응급체외살상활성실험검측기자격T세포증식급살상능력.결과:TADC여정상성숙DC상비,세포형태명현수도억제.류식세포의검측PBMC、정상DC급TADC CD86급CD1a분자양성솔,차이균유통계학의의(F분별위46.95급19.09,P<0.001).여정상DC비교,TADC CD86분자양성솔유(68.56±8.04)%강위(42.41±10.87)%,CD1a분자양성솔유(55.71±12.12)%강위(26.60±12.03)%(P균<0.05);CD1a기인표체강저,체외자격T세포증식[(112.53±7.16)%해.(91.26±6.62)%]급살상능력[(62.42±0.57)%vs.(50.37±2.21)%]균하강(t분별위6.17、17.41.P균<0.001).결론:SW620조건배양기소영조적미배경대DC적유도분화급기공능유명현적억제작용,저가능시종류세포도피궤체면역감시적궤제지일.
