CAJ | 학술논문

为制备针对重组牛γ-干扰素(rBoIFN-γ)的单克隆抗体(mAb),以纯化的原核表达融合蛋白rHis-BOIFN-γ为免疫原,用纯化的rGST-BoIFN-γ为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制抗rBoIFN-γ的mAb.结果获得13株稳定分泌抗BoIFN-γ mAb的细胞株,命名为1C12、1F7、1G5、3E6、4D5、5E11、5G4、6F8、6G6、7E9、8D3、8F8和9G11.腹水的效价除单抗9G11外,其余效价都在1:80000以上;除5G4 mAb亚类为IgG2b外,其余均为IgG1.Dot-ELISA结果表明,所得单抗只与融合蛋白rHis-BoIFN-γ和rGST-BoIFN-γ反应,而不与其它重组细胞因子和对照细菌反应,显示其良好的特异性.Western blot显示所获单抗能与相应的融合蛋白发生反应,出现特异性务带.同时所获单抗均能与牛IFN-γ标准品反应.13株单抗均为针对rBoIFN-γ的特异性mAb,为进一步研究rBoIFN-γmAb在牛的免疫调控、牛疫病的致病机制及其诊断中的应用奠定基础.
위제비침대중조우γ-간우소(rBoIFN-γ)적단극륭항체(mAb),이순화적원핵표체융합단백rHis-BOIFN-γ위면역원,용순화적rGST-BoIFN-γ위사선항원,응용림파세포잡교류기술,연제항rBoIFN-γ적mAb.결과획득13주은정분비항BoIFN-γ mAb적세포주,명명위1C12、1F7、1G5、3E6、4D5、5E11、5G4、6F8、6G6、7E9、8D3、8F8화9G11.복수적효개제단항9G11외,기여효개도재1:80000이상;제5G4 mAb아류위IgG2b외,기여균위IgG1.Dot-ELISA결과표명,소득단항지여융합단백rHis-BoIFN-γ화rGST-BoIFN-γ반응,이불여기타중조세포인자화대조세균반응,현시기량호적특이성.Western blot현시소획단항능여상응적융합단백발생반응,출현특이성무대.동시소획단항균능여우IFN-γ표준품반응.13주단항균위침대rBoIFN-γ적특이성mAb,위진일보연구rBoIFN-γmAb재우적면역조공、우역병적치병궤제급기진단중적응용전정기출.