中华临床医师杂志（电子版）
中華臨床醫師雜誌（電子版）
중화림상의사잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF CLINICIANS(ELECTRONIC VERSION)
2010年
5期
603-607
,共5页
邓爱军%姜德咏%杜玮%臧萍
鄧愛軍%薑德詠%杜瑋%臧萍
산애군%강덕영%두위%장평
视网膜新生血管化%寡核苷酸类,反义%缺氧诱导因子1,α亚基%细胞增殖
視網膜新生血管化%寡覈苷痠類,反義%缺氧誘導因子1,α亞基%細胞增殖
시망막신생혈관화%과핵감산류,반의%결양유도인자1,α아기%세포증식
目的 研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸(ASODN)对缺氧时体外培养的牛眼视网膜血管内皮细胞(BREC)增殖活性的影响,探讨HIF-1αASODN 治疗视网膜新生血管性疾病的可行性.方法 根据Genbank 提供的HIF-1αcDNA 序列设计HIF-1αASODN,全硫代修饰,并用脂质体包被,体外转染BREC 细胞,荧光显微镜下计算转染效率.采用免疫组织化学法检测HIF-1α的表达,采用免疫组织化学法和生物荧光法分别检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达、细胞内ATP 含量以分析细胞增殖能力.结果 荧光显微镜检测表明,HIF-1αASODN 可成功转染BREC.免疫荧光检测显示,未转染组缺氧开始时HIF-1α有极低表达,在缺氧1 h 时表达量显著上升,4 h 达到高峰,16 h 后下降.而ASODN 转染组HIF-1α的表达始终在极低水平,两组间差异有统计学意义(P ＜0.01).PCNA 免疫组织化学检测和细胞内ATP 含量测定结果显示,在缺氧后各检测点ASODN 转染组较对照组细胞增殖活性受到抑制,抑制作用在缺氧后8 h 最为明显(P ＜0.01).结论 HIF-1αASODN 转染能有效抑制BREC 细胞HIF-1α的表达,从而降低细胞增殖活性,可能对视网膜新生血管性疾病有治疗作用.
目的 研究缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)反義寡覈苷痠(ASODN)對缺氧時體外培養的牛眼視網膜血管內皮細胞(BREC)增殖活性的影響,探討HIF-1αASODN 治療視網膜新生血管性疾病的可行性.方法 根據Genbank 提供的HIF-1αcDNA 序列設計HIF-1αASODN,全硫代脩飾,併用脂質體包被,體外轉染BREC 細胞,熒光顯微鏡下計算轉染效率.採用免疫組織化學法檢測HIF-1α的錶達,採用免疫組織化學法和生物熒光法分彆檢測細胞增殖細胞覈抗原(PCNA)的錶達、細胞內ATP 含量以分析細胞增殖能力.結果 熒光顯微鏡檢測錶明,HIF-1αASODN 可成功轉染BREC.免疫熒光檢測顯示,未轉染組缺氧開始時HIF-1α有極低錶達,在缺氧1 h 時錶達量顯著上升,4 h 達到高峰,16 h 後下降.而ASODN 轉染組HIF-1α的錶達始終在極低水平,兩組間差異有統計學意義(P ＜0.01).PCNA 免疫組織化學檢測和細胞內ATP 含量測定結果顯示,在缺氧後各檢測點ASODN 轉染組較對照組細胞增殖活性受到抑製,抑製作用在缺氧後8 h 最為明顯(P ＜0.01).結論 HIF-1αASODN 轉染能有效抑製BREC 細胞HIF-1α的錶達,從而降低細胞增殖活性,可能對視網膜新生血管性疾病有治療作用.
목적 연구결양유도인자-1α(HIF-1α)반의과핵감산(ASODN)대결양시체외배양적우안시망막혈관내피세포(BREC)증식활성적영향,탐토HIF-1αASODN 치료시망막신생혈관성질병적가행성.방법 근거Genbank 제공적HIF-1αcDNA 서렬설계HIF-1αASODN,전류대수식,병용지질체포피,체외전염BREC 세포,형광현미경하계산전염효솔.채용면역조직화학법검측HIF-1α적표체,채용면역조직화학법화생물형광법분별검측세포증식세포핵항원(PCNA)적표체、세포내ATP 함량이분석세포증식능력.결과 형광현미경검측표명,HIF-1αASODN 가성공전염BREC.면역형광검측현시,미전염조결양개시시HIF-1α유겁저표체,재결양1 h 시표체량현저상승,4 h 체도고봉,16 h 후하강.이ASODN 전염조HIF-1α적표체시종재겁저수평,량조간차이유통계학의의(P ＜0.01).PCNA 면역조직화학검측화세포내ATP 함량측정결과현시,재결양후각검측점ASODN 전염조교대조조세포증식활성수도억제,억제작용재결양후8 h 최위명현(P ＜0.01).결론 HIF-1αASODN 전염능유효억제BREC 세포HIF-1α적표체,종이강저세포증식활성,가능대시망막신생혈관성질병유치료작용.
