中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2010年
10期
1509-1511
,共3页
耿红莲%王爱华%陆慧琦%赵文静%邓燕%竺蓓%仲人前
耿紅蓮%王愛華%陸慧琦%趙文靜%鄧燕%竺蓓%仲人前
경홍련%왕애화%륙혜기%조문정%산연%축배%중인전
Toll样受体4%小干扰RNA%表达载体%转染
Toll樣受體4%小榦擾RNA%錶達載體%轉染
Toll양수체4%소간우RNA%표체재체%전염
目的 构建并筛选到能有效抑制TLR4基因表达的小干扰RNA表达载体,用于研究TLR4基因功能.方法 RNA干扰采用体外构建小干扰RNA表达载体法,将构建好的表达载体转染单核细胞株,分别用流式细胞术和实时荧光定量RT-PCR法检测TLR4蛋白和mRNA表达变化,筛选抑制效率最高的小干扰RNA表达载体.结果 成功构建了TLR4小干扰RNA表达载体,并经电泳及测序证实;编号为S8-1的载体转染入细胞后,TLR4阳性率为27.03%,显著低于对照组的35.12%;流式细胞术和实时荧光定量RT-PCR法检测均证实编号为S8-1小干扰RNA表达载体的抑制效率最高,可用于后续实验.结论 本实验所构建的编号为S8-1小干扰RNA表达载体可有效抑制TLR4基因表达,小干扰RNA表达载体法能够抑制体外培养细胞株TLR4的表达,可用于研究TLR4基因功能.
目的 構建併篩選到能有效抑製TLR4基因錶達的小榦擾RNA錶達載體,用于研究TLR4基因功能.方法 RNA榦擾採用體外構建小榦擾RNA錶達載體法,將構建好的錶達載體轉染單覈細胞株,分彆用流式細胞術和實時熒光定量RT-PCR法檢測TLR4蛋白和mRNA錶達變化,篩選抑製效率最高的小榦擾RNA錶達載體.結果 成功構建瞭TLR4小榦擾RNA錶達載體,併經電泳及測序證實;編號為S8-1的載體轉染入細胞後,TLR4暘性率為27.03%,顯著低于對照組的35.12%;流式細胞術和實時熒光定量RT-PCR法檢測均證實編號為S8-1小榦擾RNA錶達載體的抑製效率最高,可用于後續實驗.結論 本實驗所構建的編號為S8-1小榦擾RNA錶達載體可有效抑製TLR4基因錶達,小榦擾RNA錶達載體法能夠抑製體外培養細胞株TLR4的錶達,可用于研究TLR4基因功能.
목적 구건병사선도능유효억제TLR4기인표체적소간우RNA표체재체,용우연구TLR4기인공능.방법 RNA간우채용체외구건소간우RNA표체재체법,장구건호적표체재체전염단핵세포주,분별용류식세포술화실시형광정량RT-PCR법검측TLR4단백화mRNA표체변화,사선억제효솔최고적소간우RNA표체재체.결과 성공구건료TLR4소간우RNA표체재체,병경전영급측서증실;편호위S8-1적재체전염입세포후,TLR4양성솔위27.03%,현저저우대조조적35.12%;류식세포술화실시형광정량RT-PCR법검측균증실편호위S8-1소간우RNA표체재체적억제효솔최고,가용우후속실험.결론 본실험소구건적편호위S8-1소간우RNA표체재체가유효억제TLR4기인표체,소간우RNA표체재체법능구억제체외배양세포주TLR4적표체,가용우연구TLR4기인공능.
