CAJ | 학술논문

目的:探讨对培美曲塞耐药的胰腺癌Patu8988细胞株相对于亲本株在细胞克隆、侵袭能力及多药耐药相关蛋白1(MDR1)、ABC多药转运蛋白G家族成员2(ABCG2)、ABC多药转运蛋白C家族成员3(ABCC3)耐药基因的变化.方法:采用双层软琼脂克隆实验分别在无药及加入500 μmol·L-1培美曲塞的环境下测定胰腺癌Patu8988耐药株及亲本株克隆生成能力的改变;采用Transwell侵袭小室检测两种条件下胰腺癌Patu8988侵袭能力的差异;采用RT-PCR法检测胰腺癌Patu8988细胞MDR1、ABCG2、ABCC3的mRNA表达水平,Wersten blot检测ABCG2和ABCC3的蛋白表达水平,免疫荧光及激光共聚焦检测ABCG2的表达及分布.结果:在无药及加入500 μmol·L-1培美曲塞的环境下,对培美曲塞耐药胰腺癌Patu8988细胞株的增殖克隆能力均与其亲本株有差异(P<0.05),而两种培养条件下胰腺癌Patu8988细胞株的侵袭能力变化差异无统计学意义(P>0.05).RT-PCR检测显示,在耐药株中ABCG2、ABCC3 mRNA表达分别是其亲本株的2.5倍和1.6倍左右,而MDR1 mRNA表达仅提高到1.2倍;Werstenblot结果显示蛋白表达为其亲本株的2.4倍和1.5倍.免疫荧光检测结果显示,耐药株中ABCG2的荧光强度较强,而其亲本株细胞较弱.激光共聚焦显示,耐药株中ABCG2表达主要分布于细胞膜,细胞质内也有少量分布.结论:相对于亲本株,对培美曲塞耐药的胰腺癌Patu8988细胞株克隆能力加强,而侵袭能力无明显改变.多药耐药基因表达均有不同程度的提高,以ABCG2基因表达提高尤为明显,而且其在耐药株中主要分布在细胞膜,细胞质内也有分布.
목적:탐토대배미곡새내약적이선암Patu8988세포주상대우친본주재세포극륭、침습능력급다약내약상관단백1(MDR1)、ABC다약전운단백G가족성원2(ABCG2)、ABC다약전운단백C가족성원3(ABCC3)내약기인적변화.방법:채용쌍층연경지극륭실험분별재무약급가입500 μmol·L-1배미곡새적배경하측정이선암Patu8988내약주급친본주극륭생성능력적개변;채용Transwell침습소실검측량충조건하이선암Patu8988침습능력적차이;채용RT-PCR법검측이선암Patu8988세포MDR1、ABCG2、ABCC3적mRNA표체수평,Wersten blot검측ABCG2화ABCC3적단백표체수평,면역형광급격광공취초검측ABCG2적표체급분포.결과:재무약급가입500 μmol·L-1배미곡새적배경하,대배미곡새내약이선암Patu8988세포주적증식극륭능력균여기친본주유차이(P<0.05),이량충배양조건하이선암Patu8988세포주적침습능력변화차이무통계학의의(P>0.05).RT-PCR검측현시,재내약주중ABCG2、ABCC3 mRNA표체분별시기친본주적2.5배화1.6배좌우,이MDR1 mRNA표체부제고도1.2배;Werstenblot결과현시단백표체위기친본주적2.4배화1.5배.면역형광검측결과현시,내약주중ABCG2적형광강도교강,이기친본주세포교약.격광공취초현시,내약주중ABCG2표체주요분포우세포막,세포질내야유소량분포.결론:상대우친본주,대배미곡새내약적이선암Patu8988세포주극륭능력가강,이침습능력무명현개변.다약내약기인표체균유불동정도적제고,이ABCG2기인표체제고우위명현,이차기재내약주중주요분포재세포막,세포질내야유분포.