安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
36期
20542-20546
,共5页
刘萍%顾雨辰%刘靖%夏文水
劉萍%顧雨辰%劉靖%夏文水
류평%고우신%류정%하문수
绿色木霉%双功能酶%纤维素酶%壳聚糖酶%CBH Ⅰ
綠色木黴%雙功能酶%纖維素酶%殼聚糖酶%CBH Ⅰ
록색목매%쌍공능매%섬유소매%각취당매%CBH Ⅰ
[目的]对绿色木霉诱导产生的具有壳聚糖和纤维素降解活性的双功能酶组分CCBE Ⅱ进行酶学性质研究和酶类鉴定.[方法]采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定CCBEⅡ的壳聚糖酶和纤维素酶活力,对酶的温度、pH值稳定性、底物特异性、金属离子影响等酶学性质进行研究.[结果]双功能酶CCBE Ⅱ作用壳聚糖和羧甲基纤维素钠(CMC)的最适温度均为60℃,最适作用pH值分别为5.2和4.2.金属离子Mn2+、Mg2+对酶的2种活性都有激活作用,Fe3+、Cu2+、Ag+和Hg2+则能强烈抑制2种酶活.CCBE Ⅱ对CMC和壳聚糖(84%脱乙酰度)显示出相当的降解活力,而对时硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷无降解活性;以二糖方式切割CMC,而以单糖形式切割壳聚糖,可以水解GlcN-GlcN和GlcNAc-GlcN键或GlcN-GlcNAc键.经鉴定,CCBE Ⅱ与糖苷水解酶7族的绿色木霉所产的CBH Ⅰ(gi l295937)序列具有很高的同源性,二级结构以β-折叠为主.[结论]双功能酶CCBEⅡ与从商品纤维素酶制剂中纯化的双功能酶性质基本一致,两者为同一蛋白;经鉴定实际为具有外切壳聚糖酶活性的CBH Ⅰ,属于糖苷水解酶7族.
[目的]對綠色木黴誘導產生的具有殼聚糖和纖維素降解活性的雙功能酶組分CCBE Ⅱ進行酶學性質研究和酶類鑒定.[方法]採用3,5-二硝基水楊痠(DNS)法測定CCBEⅡ的殼聚糖酶和纖維素酶活力,對酶的溫度、pH值穩定性、底物特異性、金屬離子影響等酶學性質進行研究.[結果]雙功能酶CCBE Ⅱ作用殼聚糖和羧甲基纖維素鈉(CMC)的最適溫度均為60℃,最適作用pH值分彆為5.2和4.2.金屬離子Mn2+、Mg2+對酶的2種活性都有激活作用,Fe3+、Cu2+、Ag+和Hg2+則能彊烈抑製2種酶活.CCBE Ⅱ對CMC和殼聚糖(84%脫乙酰度)顯示齣相噹的降解活力,而對時硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷無降解活性;以二糖方式切割CMC,而以單糖形式切割殼聚糖,可以水解GlcN-GlcN和GlcNAc-GlcN鍵或GlcN-GlcNAc鍵.經鑒定,CCBE Ⅱ與糖苷水解酶7族的綠色木黴所產的CBH Ⅰ(gi l295937)序列具有很高的同源性,二級結構以β-摺疊為主.[結論]雙功能酶CCBEⅡ與從商品纖維素酶製劑中純化的雙功能酶性質基本一緻,兩者為同一蛋白;經鑒定實際為具有外切殼聚糖酶活性的CBH Ⅰ,屬于糖苷水解酶7族.
[목적]대록색목매유도산생적구유각취당화섬유소강해활성적쌍공능매조분CCBE Ⅱ진행매학성질연구화매류감정.[방법]채용3,5-이초기수양산(DNS)법측정CCBEⅡ적각취당매화섬유소매활력,대매적온도、pH치은정성、저물특이성、금속리자영향등매학성질진행연구.[결과]쌍공능매CCBE Ⅱ작용각취당화최갑기섬유소납(CMC)적최괄온도균위60℃,최괄작용pH치분별위5.2화4.2.금속리자Mn2+、Mg2+대매적2충활성도유격활작용,Fe3+、Cu2+、Ag+화Hg2+칙능강렬억제2충매활.CCBE Ⅱ대CMC화각취당(84%탈을선도)현시출상당적강해활력,이대시초기분-β-D-필남포도당감무강해활성;이이당방식절할CMC,이이단당형식절할각취당,가이수해GlcN-GlcN화GlcNAc-GlcN건혹GlcN-GlcNAc건.경감정,CCBE Ⅱ여당감수해매7족적록색목매소산적CBH Ⅰ(gi l295937)서렬구유흔고적동원성,이급결구이β-절첩위주.[결론]쌍공능매CCBEⅡ여종상품섬유소매제제중순화적쌍공능매성질기본일치,량자위동일단백;경감정실제위구유외절각취당매활성적CBH Ⅰ,속우당감수해매7족.