CAJ | 학술논문

[目的]研究黑唇鼠兔乳酸脱氢酶C(LDH-C)基因的原核表达及重组蛋白的纯化.[方法]采用RT-PCR方法克隆鼠兔LDH-C基因,并将其连接到表达载体pET-32a上,构建鼠兔LDH-C基因的大肠杆菌BL21(DE3)工程菌,通过IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE进行分析,使用亲和层析方法进行蛋白纯化.[结果]RT-PCR扩增出1条约1.0 kbp的条带,与预期结果相符;重组表达载体经PCR和双酶切鉴定,产生1个约1.0 kbp的目的片段,表明表达载体构建成功;表达产物经SDS-PAGE分析,得到了分子量略大于45.0kDa以包涵体形式存在的融合蛋白;通过镍亲和层析柱进行纯化,得到了较纯的融合蛋白.[结论]黑唇鼠兔LDH-C基因被成功克隆和表达.
[목적]연구흑진서토유산탈경매C(LDH-C)기인적원핵표체급중조단백적순화.[방법]채용RT-PCR방법극륭서토LDH-C기인,병장기련접도표체재체pET-32a상,구건서토LDH-C기인적대장간균BL21(DE3)공정균,통과IPTG유도표체,표체산물용SDS-PAGE진행분석,사용친화층석방법진행단백순화.[결과]RT-PCR확증출1조약1.0 kbp적조대,여예기결과상부;중조표체재체경PCR화쌍매절감정,산생1개약1.0 kbp적목적편단,표명표체재체구건성공;표체산물경SDS-PAGE분석,득도료분자량략대우45.0kDa이포함체형식존재적융합단백;통과얼친화층석주진행순화,득도료교순적융합단백.[결론]흑진서토LDH-C기인피성공극륭화표체.