中国听力语言康复科学杂志
中國聽力語言康複科學雜誌
중국은력어언강복과학잡지
CHINESE SCIENTIFIC JOURNAL OF HEARING AND SPEECH REHABILITATION
2011年
4期
11-14
,共4页
张延平%张晓强%刘雅莉%黄玮%孙玉蕊
張延平%張曉彊%劉雅莉%黃瑋%孫玉蕊
장연평%장효강%류아리%황위%손옥예
感音神经性耳聋%缝隙连接%突变
感音神經性耳聾%縫隙連接%突變
감음신경성이롱%봉극련접%돌변
目的 将中国人常见GJB2基因突变c.235deIC真核表达载体稳定转染入HEK293细胞,建立稳定表达人c.235deIC的HEK293细胞系.方法 将pCx26-EGFP和pCx26-235deIC-EGFP转染HEK293细胞,24 h后加G418筛选两周,使用FCM分选GFP阳性细胞,继续培养.蛋白免疫印迹检测GFP表达,激光共聚焦显微镜检测蛋白表达.结果 蛋白免疫印迹显示稳定转染人pCx26-EGFP和pCx26-235deIC-EGFP的HEK293细胞都能够检测到GFP的蛋白条带,显微镜下可见稳定表达基因的HEK293细胞普遍表达GFP.结论 本研究成功构建了稳定表达中国人常见GJB2基因突变的HEK293细胞系,为今后的研究工作打下基础.
目的 將中國人常見GJB2基因突變c.235deIC真覈錶達載體穩定轉染入HEK293細胞,建立穩定錶達人c.235deIC的HEK293細胞繫.方法 將pCx26-EGFP和pCx26-235deIC-EGFP轉染HEK293細胞,24 h後加G418篩選兩週,使用FCM分選GFP暘性細胞,繼續培養.蛋白免疫印跡檢測GFP錶達,激光共聚焦顯微鏡檢測蛋白錶達.結果 蛋白免疫印跡顯示穩定轉染人pCx26-EGFP和pCx26-235deIC-EGFP的HEK293細胞都能夠檢測到GFP的蛋白條帶,顯微鏡下可見穩定錶達基因的HEK293細胞普遍錶達GFP.結論 本研究成功構建瞭穩定錶達中國人常見GJB2基因突變的HEK293細胞繫,為今後的研究工作打下基礎.
목적 장중국인상견GJB2기인돌변c.235deIC진핵표체재체은정전염입HEK293세포,건립은정표체인c.235deIC적HEK293세포계.방법 장pCx26-EGFP화pCx26-235deIC-EGFP전염HEK293세포,24 h후가G418사선량주,사용FCM분선GFP양성세포,계속배양.단백면역인적검측GFP표체,격광공취초현미경검측단백표체.결과 단백면역인적현시은정전염인pCx26-EGFP화pCx26-235deIC-EGFP적HEK293세포도능구검측도GFP적단백조대,현미경하가견은정표체기인적HEK293세포보편표체GFP.결론 본연구성공구건료은정표체중국인상견GJB2기인돌변적HEK293세포계,위금후적연구공작타하기출.
