山西农业大学学报(自然科学版)
山西農業大學學報(自然科學版)
산서농업대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SHANXI AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2011年
4期
332-337
,共6页
邢国芳%杜伟建%张雁明%韩浩坤%韩渊怀
邢國芳%杜偉建%張雁明%韓浩坤%韓淵懷
형국방%두위건%장안명%한호곤%한연부
光周期%基因克隆%基因表达%玉米CCA1
光週期%基因剋隆%基因錶達%玉米CCA1
광주기%기인극륭%기인표체%옥미CCA1
昼夜节律钟基因CCA1在调解水稻和拟南芥的光周期反应中起着重要作用.本研究利用从水稻和拟南芥中分离到的CCA1基因序列作为靶序列BLAST获取Genbank中的信息,通过RT-PCR方法克隆获得了一条2326bp的玉米CCA1基因cDNA序列.BLAST比对发现其与水稻、大麦和拟南芥的序列相似性分别达73.7%、69.4%和39.8%.利用NCBI中的ORF Finder软件分析,发现该序列包含一个2163bp的开放阅读框,编码720个氨基酸残基,蛋白的分子量约为78819.17Da,等电点为6.468.推测其含有3个myb-DNA结合域、7个N-豆蔻酰化位点、1个G-box蛋白结合域以及1个蛋白跨膜结合域.采用实时荧光定量PCR分析发现,随光照时间的变化,该基因在玉米叶片中的表达量呈现出白天不断降低而夜晚逐渐升高的昼夜变化趋势.本研究为进一步研究玉米CCA1基因在调控玉米光周期敏感现象中的功能,阐明玉米光周期敏感机制提供了科学依据.
晝夜節律鐘基因CCA1在調解水稻和擬南芥的光週期反應中起著重要作用.本研究利用從水稻和擬南芥中分離到的CCA1基因序列作為靶序列BLAST穫取Genbank中的信息,通過RT-PCR方法剋隆穫得瞭一條2326bp的玉米CCA1基因cDNA序列.BLAST比對髮現其與水稻、大麥和擬南芥的序列相似性分彆達73.7%、69.4%和39.8%.利用NCBI中的ORF Finder軟件分析,髮現該序列包含一箇2163bp的開放閱讀框,編碼720箇氨基痠殘基,蛋白的分子量約為78819.17Da,等電點為6.468.推測其含有3箇myb-DNA結閤域、7箇N-豆蔻酰化位點、1箇G-box蛋白結閤域以及1箇蛋白跨膜結閤域.採用實時熒光定量PCR分析髮現,隨光照時間的變化,該基因在玉米葉片中的錶達量呈現齣白天不斷降低而夜晚逐漸升高的晝夜變化趨勢.本研究為進一步研究玉米CCA1基因在調控玉米光週期敏感現象中的功能,闡明玉米光週期敏感機製提供瞭科學依據.
주야절률종기인CCA1재조해수도화의남개적광주기반응중기착중요작용.본연구이용종수도화의남개중분리도적CCA1기인서렬작위파서렬BLAST획취Genbank중적신식,통과RT-PCR방법극륭획득료일조2326bp적옥미CCA1기인cDNA서렬.BLAST비대발현기여수도、대맥화의남개적서렬상사성분별체73.7%、69.4%화39.8%.이용NCBI중적ORF Finder연건분석,발현해서렬포함일개2163bp적개방열독광,편마720개안기산잔기,단백적분자량약위78819.17Da,등전점위6.468.추측기함유3개myb-DNA결합역、7개N-두구선화위점、1개G-box단백결합역이급1개단백과막결합역.채용실시형광정량PCR분석발현,수광조시간적변화,해기인재옥미협편중적표체량정현출백천불단강저이야만축점승고적주야변화추세.본연구위진일보연구옥미CCA1기인재조공옥미광주기민감현상중적공능,천명옥미광주기민감궤제제공료과학의거.