重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2012年
4期
328-331
,共4页
翁敏杰%杜建霖%蒲荻%张进%李晓群%刘亚杰%余强
翁敏傑%杜建霖%蒲荻%張進%李曉群%劉亞傑%餘彊
옹민걸%두건림%포적%장진%리효군%류아걸%여강
T盒转录因子18%基因敲入%基因组DNA
T盒轉錄因子18%基因敲入%基因組DNA
T합전록인자18%기인고입%기인조DNA
目的:优化提取基因组的方法,建立高效、简便、快速提取基因组DNA的方法,用于大批量转基因小鼠鉴定.方法:用一管酒精基因组DNA抽提法抽提基因组DNA.结果:经过分光光度法检测基因组DNA浓度、纯度及电泳分析DNA质量,显示一管酒精抽提法提取的基因组与经典酚/氯仿提取法提取的基因组产量、纯度及质量没有明显差别；酶切全基因组后,2种方法获得的基因组都可以被酶完全切开；两者模板都能成功应用PCR扩增来鉴定基因敲入小鼠并可应用于基因组测序及Real-time PCR检测基因敲入小鼠中外源基因并鉴定其相对拷贝数.结论:一管酒精基因组抽提法得到的DNA质量可靠,可高效、简便、快速鉴定转基因小鼠及进行基因组DNA酶切、测序、Real-time PCR等后续实验.
目的:優化提取基因組的方法,建立高效、簡便、快速提取基因組DNA的方法,用于大批量轉基因小鼠鑒定.方法:用一管酒精基因組DNA抽提法抽提基因組DNA.結果:經過分光光度法檢測基因組DNA濃度、純度及電泳分析DNA質量,顯示一管酒精抽提法提取的基因組與經典酚/氯倣提取法提取的基因組產量、純度及質量沒有明顯差彆；酶切全基因組後,2種方法穫得的基因組都可以被酶完全切開；兩者模闆都能成功應用PCR擴增來鑒定基因敲入小鼠併可應用于基因組測序及Real-time PCR檢測基因敲入小鼠中外源基因併鑒定其相對拷貝數.結論:一管酒精基因組抽提法得到的DNA質量可靠,可高效、簡便、快速鑒定轉基因小鼠及進行基因組DNA酶切、測序、Real-time PCR等後續實驗.
목적:우화제취기인조적방법,건립고효、간편、쾌속제취기인조DNA적방법,용우대비량전기인소서감정.방법:용일관주정기인조DNA추제법추제기인조DNA.결과:경과분광광도법검측기인조DNA농도、순도급전영분석DNA질량,현시일관주정추제법제취적기인조여경전분/록방제취법제취적기인조산량、순도급질량몰유명현차별；매절전기인조후,2충방법획득적기인조도가이피매완전절개；량자모판도능성공응용PCR확증래감정기인고입소서병가응용우기인조측서급Real-time PCR검측기인고입소서중외원기인병감정기상대고패수.결론:일관주정기인조추제법득도적DNA질량가고,가고효、간편、쾌속감정전기인소서급진행기인조DNA매절、측서、Real-time PCR등후속실험.
