农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2000年
1期
29-32
,共4页
李伟%张曼夫%张新梅%王树蕙
李偉%張曼伕%張新梅%王樹蕙
리위%장만부%장신매%왕수혜
狂犬病毒%核蛋白%原核表达%亲和层析%离子交换层析
狂犬病毒%覈蛋白%原覈錶達%親和層析%離子交換層析
광견병독%핵단백%원핵표체%친화층석%리자교환층석
将狂犬病毒核蛋白结构基因重组到原核表达质粒pMAL-C2X中,经IPTG诱导表达出的MBP-NP融合蛋白分子量约98 kD,用支链淀粉琼脂糖凝胶亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白,融合蛋白用因子Xa裂解后,经Q-Sepharose离子交换层析可将MBP与NP分开,得到了电泳均一、分子量约56 kD的NP蛋白,经Western blot分析证实抗原性正确,为进一步利用NP蛋白制备抗体或单克隆抗体打下了基础.
將狂犬病毒覈蛋白結構基因重組到原覈錶達質粒pMAL-C2X中,經IPTG誘導錶達齣的MBP-NP融閤蛋白分子量約98 kD,用支鏈澱粉瓊脂糖凝膠親和層析純化得到電泳均一的融閤蛋白,融閤蛋白用因子Xa裂解後,經Q-Sepharose離子交換層析可將MBP與NP分開,得到瞭電泳均一、分子量約56 kD的NP蛋白,經Western blot分析證實抗原性正確,為進一步利用NP蛋白製備抗體或單剋隆抗體打下瞭基礎.
장광견병독핵단백결구기인중조도원핵표체질립pMAL-C2X중,경IPTG유도표체출적MBP-NP융합단백분자량약98 kD,용지련정분경지당응효친화층석순화득도전영균일적융합단백,융합단백용인자Xa렬해후,경Q-Sepharose리자교환층석가장MBP여NP분개,득도료전영균일、분자량약56 kD적NP단백,경Western blot분석증실항원성정학,위진일보이용NP단백제비항체혹단극륭항체타하료기출.
