高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2003年
11期
27-30
,共4页
李董%袁文肃%马小彤%蔡辉国%明宇%李静%赵春华
李董%袁文肅%馬小彤%蔡輝國%明宇%李靜%趙春華
리동%원문숙%마소동%채휘국%명우%리정%조춘화
人IL6/IL2融合蛋白%发酵%分离纯化
人IL6/IL2融閤蛋白%髮酵%分離純化
인IL6/IL2융합단백%발효%분리순화
克隆的IL-6/IL-2融合蛋白编码基因插入pBV220载体,转化BL21(DE3)菌株中表达.发酵过程中,30℃扩增生长6小时,42℃诱导培养4小时,控制溶解氧在30%～50%.发酵液中最终菌体密度(OD600)达29.17(相当于每升发酵液含55克湿菌体),表达的融合蛋白呈包涵体形式.表达蛋白占菌体总蛋白的30%左右.菌体经过超声破碎后反复洗涤包涵体,融合蛋白纯度达到70%,进一步用离子交换层析和凝胶过滤层析纯化使其纯度达95%以上.IL-6/2融合蛋白中的IL-6和IL-2活性分别为1×107和2×105U/mg.重组人IL-6/IL-2融合蛋白在大肠杆菌中达到了中试水平的高表达.
剋隆的IL-6/IL-2融閤蛋白編碼基因插入pBV220載體,轉化BL21(DE3)菌株中錶達.髮酵過程中,30℃擴增生長6小時,42℃誘導培養4小時,控製溶解氧在30%～50%.髮酵液中最終菌體密度(OD600)達29.17(相噹于每升髮酵液含55剋濕菌體),錶達的融閤蛋白呈包涵體形式.錶達蛋白佔菌體總蛋白的30%左右.菌體經過超聲破碎後反複洗滌包涵體,融閤蛋白純度達到70%,進一步用離子交換層析和凝膠過濾層析純化使其純度達95%以上.IL-6/2融閤蛋白中的IL-6和IL-2活性分彆為1×107和2×105U/mg.重組人IL-6/IL-2融閤蛋白在大腸桿菌中達到瞭中試水平的高錶達.
극륭적IL-6/IL-2융합단백편마기인삽입pBV220재체,전화BL21(DE3)균주중표체.발효과정중,30℃확증생장6소시,42℃유도배양4소시,공제용해양재30%～50%.발효액중최종균체밀도(OD600)체29.17(상당우매승발효액함55극습균체),표체적융합단백정포함체형식.표체단백점균체총단백적30%좌우.균체경과초성파쇄후반복세조포함체,융합단백순도체도70%,진일보용리자교환층석화응효과려층석순화사기순도체95%이상.IL-6/2융합단백중적IL-6화IL-2활성분별위1×107화2×105U/mg.중조인IL-6/IL-2융합단백재대장간균중체도료중시수평적고표체.
