中国肿瘤生物治疗杂志
中國腫瘤生物治療雜誌
중국종류생물치료잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER BIOTHERAPY
2005年
2期
116-119
,共4页
吴冰%王燕%任继鸿%赵辉%张利潮%张惠中
吳冰%王燕%任繼鴻%趙輝%張利潮%張惠中
오빙%왕연%임계홍%조휘%장리조%장혜중
survivin基因%启动子%基因治疗%HeLa细胞
survivin基因%啟動子%基因治療%HeLa細胞
survivin기인%계동자%기인치료%HeLa세포
目的: 构建带有survivin启动子的pGL3Basic真核表达载体,探讨survivin启动子在HeLa细胞中的特异表达活性.方法: 采用PCR技术扩增survivin启动子,插入pGL3Basic载体,构建携带survivin启动子的pGL3Basic真核表达载体(pGL3Basic/ Surp).纯化pGL3Basic/ Surp质粒,用脂质体法转染HeLa细胞和正常血管内皮细胞ECV304,48 h后收集转染细胞与荧光素酶底物反应,检测荧光素酶活性.结果: 成功克隆1 kb survivin基因启动子,并构建了携带有survivin基因启动子的pGL3Basic真核表达载体,转染后的Hela细胞荧光素酶活性为2074.2±78.5,而ECV304荧光素酶活性为9.7±1.1.结论: 成功克隆的survivin启动子在HeLa细胞中表现出较高的肿瘤特异性活性,为进一步开发肿瘤的靶向基因治疗奠定了基础.
目的: 構建帶有survivin啟動子的pGL3Basic真覈錶達載體,探討survivin啟動子在HeLa細胞中的特異錶達活性.方法: 採用PCR技術擴增survivin啟動子,插入pGL3Basic載體,構建攜帶survivin啟動子的pGL3Basic真覈錶達載體(pGL3Basic/ Surp).純化pGL3Basic/ Surp質粒,用脂質體法轉染HeLa細胞和正常血管內皮細胞ECV304,48 h後收集轉染細胞與熒光素酶底物反應,檢測熒光素酶活性.結果: 成功剋隆1 kb survivin基因啟動子,併構建瞭攜帶有survivin基因啟動子的pGL3Basic真覈錶達載體,轉染後的Hela細胞熒光素酶活性為2074.2±78.5,而ECV304熒光素酶活性為9.7±1.1.結論: 成功剋隆的survivin啟動子在HeLa細胞中錶現齣較高的腫瘤特異性活性,為進一步開髮腫瘤的靶嚮基因治療奠定瞭基礎.
목적: 구건대유survivin계동자적pGL3Basic진핵표체재체,탐토survivin계동자재HeLa세포중적특이표체활성.방법: 채용PCR기술확증survivin계동자,삽입pGL3Basic재체,구건휴대survivin계동자적pGL3Basic진핵표체재체(pGL3Basic/ Surp).순화pGL3Basic/ Surp질립,용지질체법전염HeLa세포화정상혈관내피세포ECV304,48 h후수집전염세포여형광소매저물반응,검측형광소매활성.결과: 성공극륭1 kb survivin기인계동자,병구건료휴대유survivin기인계동자적pGL3Basic진핵표체재체,전염후적Hela세포형광소매활성위2074.2±78.5,이ECV304형광소매활성위9.7±1.1.결론: 성공극륭적survivin계동자재HeLa세포중표현출교고적종류특이성활성,위진일보개발종류적파향기인치료전정료기출.
