中国寄生虫病防治杂志
中國寄生蟲病防治雜誌
중국기생충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITIC DISEASE CONTROL
2005年
4期
255-258
,共4页
旋毛虫%肌幼虫%排泄分泌抗原%杂交瘤细胞%单克隆抗体
鏇毛蟲%肌幼蟲%排洩分泌抗原%雜交瘤細胞%單剋隆抗體
선모충%기유충%배설분비항원%잡교류세포%단극륭항체
目的制备分泌抗旋毛虫肌幼虫排泄分泌(ES)抗原单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株,并对其及分泌的McAb进行鉴定. 方法用旋毛虫肌幼虫ES抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选分泌特异性、高滴度McAb的杂交瘤细胞株,制备腹水,进行纯化.ELISA间接法、夹心法和竞争法分别测定McAb滴度、相对亲和力和相加效应,琼脂双扩散试验鉴定免疫球蛋白类型,检测McAb与其他寄生虫抗原的交叉反应.电镜观察杂交瘤细胞超微结构,计数染色体数目及观察杂交瘤细胞分泌McAb的稳定性. 结果筛选出2株(B2C12和E11F11)分泌抗旋毛虫肌幼虫ES抗原McAb杂交瘤细胞株.电镜显示,杂交瘤细胞具有肿瘤细胞和浆细胞的特征,胞浆内可见大量分泌颗粒;杂交瘤细胞染色体数目平均为98.6条,均能稳定分泌McAb(属IgM).B2C12株培养上清液和腹水McAb滴度分别为1∶1 280和1∶2.048×104,E11F11株为1∶640和1∶1.024×104,其中前者的相对亲和力较后者稍高.2株McAb识别ES抗原不同的抗原决定簇;且不与其他寄生虫抗原发生交叉反应. 结论获得2株抗旋毛虫肌幼虫ES抗原杂交瘤细胞株,均能稳定分泌高滴度、特异性的IgM类McAb,并识别不同的抗原决定簇,为研制旋毛虫病诊断试剂盒和制备基因工程抗体奠定了基础.
目的製備分泌抗鏇毛蟲肌幼蟲排洩分泌(ES)抗原單剋隆抗體(McAb)雜交瘤細胞株,併對其及分泌的McAb進行鑒定. 方法用鏇毛蟲肌幼蟲ES抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾細胞與SP2/0細胞融閤,篩選分泌特異性、高滴度McAb的雜交瘤細胞株,製備腹水,進行純化.ELISA間接法、夾心法和競爭法分彆測定McAb滴度、相對親和力和相加效應,瓊脂雙擴散試驗鑒定免疫毬蛋白類型,檢測McAb與其他寄生蟲抗原的交扠反應.電鏡觀察雜交瘤細胞超微結構,計數染色體數目及觀察雜交瘤細胞分泌McAb的穩定性. 結果篩選齣2株(B2C12和E11F11)分泌抗鏇毛蟲肌幼蟲ES抗原McAb雜交瘤細胞株.電鏡顯示,雜交瘤細胞具有腫瘤細胞和漿細胞的特徵,胞漿內可見大量分泌顆粒;雜交瘤細胞染色體數目平均為98.6條,均能穩定分泌McAb(屬IgM).B2C12株培養上清液和腹水McAb滴度分彆為1∶1 280和1∶2.048×104,E11F11株為1∶640和1∶1.024×104,其中前者的相對親和力較後者稍高.2株McAb識彆ES抗原不同的抗原決定簇;且不與其他寄生蟲抗原髮生交扠反應. 結論穫得2株抗鏇毛蟲肌幼蟲ES抗原雜交瘤細胞株,均能穩定分泌高滴度、特異性的IgM類McAb,併識彆不同的抗原決定簇,為研製鏇毛蟲病診斷試劑盒和製備基因工程抗體奠定瞭基礎.
목적제비분비항선모충기유충배설분비(ES)항원단극륭항체(McAb)잡교류세포주,병대기급분비적McAb진행감정. 방법용선모충기유충ES항원면역BALB/c소서,취기비세포여SP2/0세포융합,사선분비특이성、고적도McAb적잡교류세포주,제비복수,진행순화.ELISA간접법、협심법화경쟁법분별측정McAb적도、상대친화력화상가효응,경지쌍확산시험감정면역구단백류형,검측McAb여기타기생충항원적교차반응.전경관찰잡교류세포초미결구,계수염색체수목급관찰잡교류세포분비McAb적은정성. 결과사선출2주(B2C12화E11F11)분비항선모충기유충ES항원McAb잡교류세포주.전경현시,잡교류세포구유종류세포화장세포적특정,포장내가견대량분비과립;잡교류세포염색체수목평균위98.6조,균능은정분비McAb(속IgM).B2C12주배양상청액화복수McAb적도분별위1∶1 280화1∶2.048×104,E11F11주위1∶640화1∶1.024×104,기중전자적상대친화력교후자초고.2주McAb식별ES항원불동적항원결정족;차불여기타기생충항원발생교차반응. 결론획득2주항선모충기유충ES항원잡교류세포주,균능은정분비고적도、특이성적IgM류McAb,병식별불동적항원결정족,위연제선모충병진단시제합화제비기인공정항체전정료기출.
