第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2007年
11期
1003-1005
,共3页
王颖莹%陈纯海%裴莉萍%张伟%Norbert E. Kaminski
王穎瑩%陳純海%裴莉萍%張偉%Norbert E. Kaminski
왕영형%진순해%배리평%장위%Norbert E. Kaminski
2型大麻受体%基因克隆%真核表达
2型大痳受體%基因剋隆%真覈錶達
2형대마수체%기인극륭%진핵표체
目的 克隆人2型大麻受体(hCB2)基因,并构建相应的稳定表达细胞株.方法 利用人T淋巴细胞株HPB-ALL的总RNA,以RT-PCR及酶切、连接等分子生物学方法克隆hCB2基因于质粒载体pFlag-CMV-3内,以HEK293细胞构建稳定表达细胞株,以Western blot方法利用蛋白标记Flag的单克隆抗体(Anti-Flag)和CB2多克隆抗体(Anti-CB2)同时检测质粒的表达.结果 酶切及测序结果表明hCB2基因克隆成功,Western blot检测结果表明Anti-Flag和Anti-CB2都能检测Flag-hCB2蛋白.结论 成功克隆hCB2基因,并获得稳定表达细胞株,同时证实Anti-CB2多克隆抗体有效.
目的 剋隆人2型大痳受體(hCB2)基因,併構建相應的穩定錶達細胞株.方法 利用人T淋巴細胞株HPB-ALL的總RNA,以RT-PCR及酶切、連接等分子生物學方法剋隆hCB2基因于質粒載體pFlag-CMV-3內,以HEK293細胞構建穩定錶達細胞株,以Western blot方法利用蛋白標記Flag的單剋隆抗體(Anti-Flag)和CB2多剋隆抗體(Anti-CB2)同時檢測質粒的錶達.結果 酶切及測序結果錶明hCB2基因剋隆成功,Western blot檢測結果錶明Anti-Flag和Anti-CB2都能檢測Flag-hCB2蛋白.結論 成功剋隆hCB2基因,併穫得穩定錶達細胞株,同時證實Anti-CB2多剋隆抗體有效.
목적 극륭인2형대마수체(hCB2)기인,병구건상응적은정표체세포주.방법 이용인T림파세포주HPB-ALL적총RNA,이RT-PCR급매절、련접등분자생물학방법극륭hCB2기인우질립재체pFlag-CMV-3내,이HEK293세포구건은정표체세포주,이Western blot방법이용단백표기Flag적단극륭항체(Anti-Flag)화CB2다극륭항체(Anti-CB2)동시검측질립적표체.결과 매절급측서결과표명hCB2기인극륭성공,Western blot검측결과표명Anti-Flag화Anti-CB2도능검측Flag-hCB2단백.결론 성공극륭hCB2기인,병획득은정표체세포주,동시증실Anti-CB2다극륭항체유효.
