经济林研究
經濟林研究
경제림연구
ECONOMIC FOREST RESEARCHES
2009年
3期
1-6
,共6页
沈程文%黄意欢%黄建安%罗军武%赵超艺
瀋程文%黃意歡%黃建安%囉軍武%趙超藝
침정문%황의환%황건안%라군무%조초예
茶树%种质资源%SRAP%体系优化
茶樹%種質資源%SRAP%體繫優化
다수%충질자원%SRAP%체계우화
以Me3和Em5正反向引物组合对凤凰水仙茶树品种进行了SRAP分析体系的优化.结果表明:茶树SRAP-PCR最佳反应体系为:Mgz+浓度3.0 mmol·L-1;Taq酶2.0 U;dNTPs浓度0.2 mmol·L-1;引物浓度2.0 μmol·L-1;10×Buffer 2.0μL;模板DNA 20 ng;反应总体积为25 μL.经过重复试验,确定茶树SRAP-PCR扩增程序为:94℃预变性5min;94C变性1min,35℃复性1min,72℃延伸100 s,5个循环;94C变性1 min,50℃复性1 min,72 C延伸100 s,35个循环·最后72℃延伸5 min.采用已优化的体系对30份茶树品种进行SRAP分析,经2%的琼脂糖凝胶电泳得到了清晰且重复性好的扩增谱带,说明该反应体系稳定可靠,适用于茶树种质资源的分子标记分析.
以Me3和Em5正反嚮引物組閤對鳳凰水仙茶樹品種進行瞭SRAP分析體繫的優化.結果錶明:茶樹SRAP-PCR最佳反應體繫為:Mgz+濃度3.0 mmol·L-1;Taq酶2.0 U;dNTPs濃度0.2 mmol·L-1;引物濃度2.0 μmol·L-1;10×Buffer 2.0μL;模闆DNA 20 ng;反應總體積為25 μL.經過重複試驗,確定茶樹SRAP-PCR擴增程序為:94℃預變性5min;94C變性1min,35℃複性1min,72℃延伸100 s,5箇循環;94C變性1 min,50℃複性1 min,72 C延伸100 s,35箇循環·最後72℃延伸5 min.採用已優化的體繫對30份茶樹品種進行SRAP分析,經2%的瓊脂糖凝膠電泳得到瞭清晰且重複性好的擴增譜帶,說明該反應體繫穩定可靠,適用于茶樹種質資源的分子標記分析.
이Me3화Em5정반향인물조합대봉황수선다수품충진행료SRAP분석체계적우화.결과표명:다수SRAP-PCR최가반응체계위:Mgz+농도3.0 mmol·L-1;Taq매2.0 U;dNTPs농도0.2 mmol·L-1;인물농도2.0 μmol·L-1;10×Buffer 2.0μL;모판DNA 20 ng;반응총체적위25 μL.경과중복시험,학정다수SRAP-PCR확증정서위:94℃예변성5min;94C변성1min,35℃복성1min,72℃연신100 s,5개순배;94C변성1 min,50℃복성1 min,72 C연신100 s,35개순배·최후72℃연신5 min.채용이우화적체계대30빈다수품충진행SRAP분석,경2%적경지당응효전영득도료청석차중복성호적확증보대,설명해반응체계은정가고,괄용우다수충질자원적분자표기분석.
