河北农业科学
河北農業科學
하북농업과학
JOURNAL OF HEBEI AGRICULTURAL SCIENCES
2010年
12期
43-45
,共3页
鲫鱼%新型SNRPC%蛋白表达%多克隆抗体%抗体%制备
鯽魚%新型SNRPC%蛋白錶達%多剋隆抗體%抗體%製備
즉어%신형SNRPC%단백표체%다극륭항체%항체%제비
本研究构建了鲫鱼卵母细胞特异表达的新型SNRPC基因的原核表达载体,表达并纯化蛋白.制备多克隆抗体,并检测抗体特异性,为进一步研究新型SNRPC基因的功能奠定基础.首先设计引物,应用RT-PCR从鲫鱼成熟卵母细胞中获得含该基因片段,重组入原核表达载体PinPoint T中,在大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达,应用亲和层析法获得纯度较高的原核表达蛋白并免疫家兔制备多克隆抗体,用Western blot方法检测此抗体特异性.成功构建了新型SNRPC基因重组表达载体,表达的蛋白经纯化后免疫家兔得到了特异的多克隆抗体.鲫鱼卵母细胞的新型SNRPC基因的原核表达载体的构建、重组蛋白的表达纯化及抗体的制备为后续的研究提供了理论基础.
本研究構建瞭鯽魚卵母細胞特異錶達的新型SNRPC基因的原覈錶達載體,錶達併純化蛋白.製備多剋隆抗體,併檢測抗體特異性,為進一步研究新型SNRPC基因的功能奠定基礎.首先設計引物,應用RT-PCR從鯽魚成熟卵母細胞中穫得含該基因片段,重組入原覈錶達載體PinPoint T中,在大腸桿菌BL-21(DE3)中誘導錶達,應用親和層析法穫得純度較高的原覈錶達蛋白併免疫傢兔製備多剋隆抗體,用Western blot方法檢測此抗體特異性.成功構建瞭新型SNRPC基因重組錶達載體,錶達的蛋白經純化後免疫傢兔得到瞭特異的多剋隆抗體.鯽魚卵母細胞的新型SNRPC基因的原覈錶達載體的構建、重組蛋白的錶達純化及抗體的製備為後續的研究提供瞭理論基礎.
본연구구건료즉어란모세포특이표체적신형SNRPC기인적원핵표체재체,표체병순화단백.제비다극륭항체,병검측항체특이성,위진일보연구신형SNRPC기인적공능전정기출.수선설계인물,응용RT-PCR종즉어성숙란모세포중획득함해기인편단,중조입원핵표체재체PinPoint T중,재대장간균BL-21(DE3)중유도표체,응용친화층석법획득순도교고적원핵표체단백병면역가토제비다극륭항체,용Western blot방법검측차항체특이성.성공구건료신형SNRPC기인중조표체재체,표체적단백경순화후면역가토득도료특이적다극륭항체.즉어란모세포적신형SNRPC기인적원핵표체재체적구건、중조단백적표체순화급항체적제비위후속적연구제공료이론기출.
