解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2011年
2期
175-179
,共5页
MIP基因%FASP1%MafF%亚细胞定位%荧光融合蛋白%激光扫描共焦显微镜
MIP基因%FASP1%MafF%亞細胞定位%熒光融閤蛋白%激光掃描共焦顯微鏡
MIP기인%FASP1%MafF%아세포정위%형광융합단백%격광소묘공초현미경
目的 探讨肿瘤相关基因MIP的亚细胞定位情况,以及MIP与其相互作用蛋白FASP1、MafF共转染HeLa细胞后亚细胞定位的变化和共定位情况.方法利用在线蛋白质结构和亚细胞定位分析软件,对MIP可能的蛋白结构和亚细胞定位进行分析预测;结合分析结果,采用荧光蛋白融合表达和激光扫描共焦显微技术,观察比较MIP融合于绿色荧光蛋白(GFP)的N端或C端时在HeLa细胞中的亚细胞定位情况.pDsRed-FASP1、pDsRed-MafF分别单独转染,或者与MIP-GFP共同转染HeLa细胞,观察红色、绿色荧光蛋白的分布,分析比较各蛋白的亚细胞定位、变化及共定位情况.结果单独转染时,MIP主要呈不均匀点状分布于细胞质;GFP融合于MIP蛋白的N端或者C端,其亚细胞定位略有变化,MIP-GFP的不均匀分布更加典型,在胞质中呈点状聚集.DsRed-FASP1单独转染时弥散分布于细胞质;与MIP-GFP共同转染后,MIP与FASP1在细胞内的分布没有大的改变,两者能够共定位于细胞质.DsRed-MafF单独转染时弥散分布于细胞核;而与MafF-GFP共同转染时,两者的亚细胞定位均发生显著改变,此时两者能够共定位于细胞核内核仁区.结论 MIP能够与FASP1、MafF在细胞内不同部位相互作用.MIP在细胞质和细胞核中的定位变化,提示MIP可能作为一个重要的信号分子,在细胞质和细胞核中发挥多重作用.
目的 探討腫瘤相關基因MIP的亞細胞定位情況,以及MIP與其相互作用蛋白FASP1、MafF共轉染HeLa細胞後亞細胞定位的變化和共定位情況.方法利用在線蛋白質結構和亞細胞定位分析軟件,對MIP可能的蛋白結構和亞細胞定位進行分析預測;結閤分析結果,採用熒光蛋白融閤錶達和激光掃描共焦顯微技術,觀察比較MIP融閤于綠色熒光蛋白(GFP)的N耑或C耑時在HeLa細胞中的亞細胞定位情況.pDsRed-FASP1、pDsRed-MafF分彆單獨轉染,或者與MIP-GFP共同轉染HeLa細胞,觀察紅色、綠色熒光蛋白的分佈,分析比較各蛋白的亞細胞定位、變化及共定位情況.結果單獨轉染時,MIP主要呈不均勻點狀分佈于細胞質;GFP融閤于MIP蛋白的N耑或者C耑,其亞細胞定位略有變化,MIP-GFP的不均勻分佈更加典型,在胞質中呈點狀聚集.DsRed-FASP1單獨轉染時瀰散分佈于細胞質;與MIP-GFP共同轉染後,MIP與FASP1在細胞內的分佈沒有大的改變,兩者能夠共定位于細胞質.DsRed-MafF單獨轉染時瀰散分佈于細胞覈;而與MafF-GFP共同轉染時,兩者的亞細胞定位均髮生顯著改變,此時兩者能夠共定位于細胞覈內覈仁區.結論 MIP能夠與FASP1、MafF在細胞內不同部位相互作用.MIP在細胞質和細胞覈中的定位變化,提示MIP可能作為一箇重要的信號分子,在細胞質和細胞覈中髮揮多重作用.
목적 탐토종류상관기인MIP적아세포정위정황,이급MIP여기상호작용단백FASP1、MafF공전염HeLa세포후아세포정위적변화화공정위정황.방법이용재선단백질결구화아세포정위분석연건,대MIP가능적단백결구화아세포정위진행분석예측;결합분석결과,채용형광단백융합표체화격광소묘공초현미기술,관찰비교MIP융합우록색형광단백(GFP)적N단혹C단시재HeLa세포중적아세포정위정황.pDsRed-FASP1、pDsRed-MafF분별단독전염,혹자여MIP-GFP공동전염HeLa세포,관찰홍색、록색형광단백적분포,분석비교각단백적아세포정위、변화급공정위정황.결과단독전염시,MIP주요정불균균점상분포우세포질;GFP융합우MIP단백적N단혹자C단,기아세포정위략유변화,MIP-GFP적불균균분포경가전형,재포질중정점상취집.DsRed-FASP1단독전염시미산분포우세포질;여MIP-GFP공동전염후,MIP여FASP1재세포내적분포몰유대적개변,량자능구공정위우세포질.DsRed-MafF단독전염시미산분포우세포핵;이여MafF-GFP공동전염시,량자적아세포정위균발생현저개변,차시량자능구공정위우세포핵내핵인구.결론 MIP능구여FASP1、MafF재세포내불동부위상호작용.MIP재세포질화세포핵중적정위변화,제시MIP가능작위일개중요적신호분자,재세포질화세포핵중발휘다중작용.
