实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2010年
17期
1317-1319
,共3页
肾小球系膜细胞%醛固酮%活性氧%表皮生长因子受体%胞外信号调节激酶
腎小毬繫膜細胞%醛固酮%活性氧%錶皮生長因子受體%胞外信號調節激酶
신소구계막세포%철고동%활성양%표피생장인자수체%포외신호조절격매
目的 探讨活性氧(ROS)介导的表皮生长因子受体(EGFR)磷酸化在醛固酮(ALDO)诱导的肾小球系膜细胞胞外信号调节激酶(ERK1/2)信号通路活化中的作用.方法 体外培养人肾小球系膜细胞,应用ALDO刺激或应用不同阻断剂预处理后再加入ALDO刺激,应用荧光探针2,7-二氯二氢荧光素乙酰乙酸(DCFDA)检测细胞内ROS的产生;Western blot检测EGFR、Ki-RasA、c-Raf、丝裂原活化蛋白蛋白激酶(MEK1/2)和ERK1/2活化.结果 ALDO可呈时间依赖性和剂量依赖性的方式促进肾小球系膜细胞ROS产生,100nmol·L-1 ALDO刺激60min,系膜细胞ROS的产生是对照组的2.54倍.ALDO可显著活化系膜细胞EGFR,ALDO刺激60min,EGFR活性是对照组的5.50倍,盐皮质激素受体(MR)抑制剂依普利酮和抗氧化剂乙酰半胱氨酸(NAC)几乎完全阻断ALDO诱导的EGFR磷酸化.ALDO刺激系膜细胞3h,活化的Ki-RasA、c-Raf、MEK1/2和ERK1/2表达显著增强,分别是对照组的4.05倍、3.62倍、4.52倍和3.40倍.抗氧化剂NAC和EGFR特异性抑制剂AG21478几乎完全阻断ALDO诱导的Ki-RasA、c-Raf、MEK1/2和ERK1/2活化.结论 ALDO可通过ROS依赖的EGFR磷酸化活化Ki-RasA/c-Raf/MEK/ERK信号通路.
目的 探討活性氧(ROS)介導的錶皮生長因子受體(EGFR)燐痠化在醛固酮(ALDO)誘導的腎小毬繫膜細胞胞外信號調節激酶(ERK1/2)信號通路活化中的作用.方法 體外培養人腎小毬繫膜細胞,應用ALDO刺激或應用不同阻斷劑預處理後再加入ALDO刺激,應用熒光探針2,7-二氯二氫熒光素乙酰乙痠(DCFDA)檢測細胞內ROS的產生;Western blot檢測EGFR、Ki-RasA、c-Raf、絲裂原活化蛋白蛋白激酶(MEK1/2)和ERK1/2活化.結果 ALDO可呈時間依賴性和劑量依賴性的方式促進腎小毬繫膜細胞ROS產生,100nmol·L-1 ALDO刺激60min,繫膜細胞ROS的產生是對照組的2.54倍.ALDO可顯著活化繫膜細胞EGFR,ALDO刺激60min,EGFR活性是對照組的5.50倍,鹽皮質激素受體(MR)抑製劑依普利酮和抗氧化劑乙酰半胱氨痠(NAC)幾乎完全阻斷ALDO誘導的EGFR燐痠化.ALDO刺激繫膜細胞3h,活化的Ki-RasA、c-Raf、MEK1/2和ERK1/2錶達顯著增彊,分彆是對照組的4.05倍、3.62倍、4.52倍和3.40倍.抗氧化劑NAC和EGFR特異性抑製劑AG21478幾乎完全阻斷ALDO誘導的Ki-RasA、c-Raf、MEK1/2和ERK1/2活化.結論 ALDO可通過ROS依賴的EGFR燐痠化活化Ki-RasA/c-Raf/MEK/ERK信號通路.
목적 탐토활성양(ROS)개도적표피생장인자수체(EGFR)린산화재철고동(ALDO)유도적신소구계막세포포외신호조절격매(ERK1/2)신호통로활화중적작용.방법 체외배양인신소구계막세포,응용ALDO자격혹응용불동조단제예처리후재가입ALDO자격,응용형광탐침2,7-이록이경형광소을선을산(DCFDA)검측세포내ROS적산생;Western blot검측EGFR、Ki-RasA、c-Raf、사렬원활화단백단백격매(MEK1/2)화ERK1/2활화.결과 ALDO가정시간의뢰성화제량의뢰성적방식촉진신소구계막세포ROS산생,100nmol·L-1 ALDO자격60min,계막세포ROS적산생시대조조적2.54배.ALDO가현저활화계막세포EGFR,ALDO자격60min,EGFR활성시대조조적5.50배,염피질격소수체(MR)억제제의보리동화항양화제을선반광안산(NAC)궤호완전조단ALDO유도적EGFR린산화.ALDO자격계막세포3h,활화적Ki-RasA、c-Raf、MEK1/2화ERK1/2표체현저증강,분별시대조조적4.05배、3.62배、4.52배화3.40배.항양화제NAC화EGFR특이성억제제AG21478궤호완전조단ALDO유도적Ki-RasA、c-Raf、MEK1/2화ERK1/2활화.결론 ALDO가통과ROS의뢰적EGFR린산화활화Ki-RasA/c-Raf/MEK/ERK신호통로.
